丙型肝炎病毒核心蛋白6号结合蛋白基因启动子序列的确定及转录活性鉴定 |
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引用本文: | 王琳,成军,李克,洪源.丙型肝炎病毒核心蛋白6号结合蛋白基因启动子序列的确定及转录活性鉴定[J].中华肝脏病杂志,2006,14(2):81-85. |
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作者姓名: | 王琳 成军 李克 洪源 |
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作者单位: | 100039,北京,解放军第三○二医院传染病研究所病毒性肝炎研究室 |
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摘 要: | 目的研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白6号结合蛋白基因(Hcbp6)序列表达的调控机制。方法根据软件对启动子的预测,选取翻译起始密码子ATG上游3256bp及下游180bp的DNA序列,分成5段活性区域,分别以聚合酶链反应技术(PCR),肝母细胞瘤细胞系HePG2基因组DNA为模板,扩增该启动子DNA片段,将其克隆至PCAT3中,构建PCAT3-Hcbp6-P报告基因表达载体,将该质粒分别转染HePG2,NIH3T3细胞,用酶联免疫吸附法检测报告基因编码产物氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性。结果发现质粒pCAT3-Hcbp6-1066p和pCAT3-Hcbp6-240p能够指导CAT的表达,其平均吸光度值(4)是PCAT3-basic对照质粒的3.1倍和6.4倍。结论本研究克隆的启动子DNA序列具有转录活性,这一结果为研究HcbP6的调节机制,进一步阐明HCV核心蛋白的作用机制奠定了基础。
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关 键 词: | 肝炎病毒 丙型 启动子 Hcbp6 |
收稿时间: | 2005-06-06 |
修稿时间: | 2005年6月6日 |
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