| 甲苯生物降解的关键酶基因克隆及表达 |
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| 引用本文： | 杨凯,缪晓燕,陈琼斯,章婷婷,叶薇,吕建新.甲苯生物降解的关键酶基因克隆及表达[J].温州医学院学报,2012,42(6):556-560. |
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| 作者姓名： | 杨凯 缪晓燕 陈琼斯 章婷婷 叶薇 吕建新 |
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| 作者单位： | 温州医学院检验医学院,浙江温州,325035 |
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| 基金项目： | 浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)，浙江省教育厅科研基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:克隆、表达恶臭假单胞菌生物降解甲苯的关键酶基因。方法:恶臭假单胞菌WZ-1在含甲苯的MS培养基中培养以鉴定其降解甲苯的能力。设计引物扩增甲苯生物降解的关键酶——甲苯双加氧酶和邻苯二酚1,2双加氧酶基因,PCR扩增目的片段后进行T-A克隆,筛选阳性克隆并鉴定。构建甲苯双加氧酶-pET28a进行体外诱导表达。结果:恶臭假单胞菌WZ-1在含甲苯的MS培养基的生长曲线证明其具有降解甲苯的能力;通过重组技术获得阳性克隆,并以酶切、DNA测序进行鉴定;IPTG诱导后获得重组甲苯双加氧酶的高表达。结论:成功获得了用于降解甲苯的甲苯双加氧酶基因和邻苯二酚1,2双加氧酶基因,并在体外诱导表达了目的蛋白,为后续利用模式生物对苯系物的生物降解建立了实验基础。
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| 关 键 词： | 恶臭假单胞菌 甲苯 克隆 原核表达 |
Cloning and expression of the genes of key enzymes in toluene degeneration |
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| YANG Kai
,
MIAO Xiaoyan
,
CHEN Qiongsi
,
ZHANG Tingting
,
YE Wei
,
L Jianxin.Cloning and expression of the genes of key enzymes in toluene degeneration[J].Journal of Wenzhou Medical College,2012,42(6):556-560. |
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| Authors: | YANG Kai MIAO Xiaoyan CHEN Qiongsi ZHANG Tingting YE Wei L Jianxin |
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| Institution: | YANG Kai
,
MIAO Xiaoyan
,
CHEN Qiongsi
,
ZHANG Tingting
,
YE Wei
,
L(U) Jianxin |
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| Abstract: | |
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