| 表达大鼠caspase-3 siRNA腺病毒的构建及其对神经元凋亡的影响 |
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| 引用本文： | 吴飞翔,俞卫锋,袁扬,缪雪蓉,徐学武,黄盛东,孙玉明,吴镜湘. 表达大鼠caspase-3 siRNA腺病毒的构建及其对神经元凋亡的影响[J]. 中华麻醉学杂志, 2008, 28(2) |
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| 作者姓名： | 吴飞翔 俞卫锋 袁扬 缪雪蓉 徐学武 黄盛东 孙玉明 吴镜湘 |
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| 作者单位： | 1. 第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科,上海市,200438
2. 解放军胸心外科研究所 |
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| 摘 要： | 目的 构建表达大鼠caspase-3 siRNA腺病毒,体外观察其抑制内毒素诱导神经元凋亡的效果.方法 合成正、反义寡核苷酸并克隆入pShuttleH1载体,与含caspase-3及绿色荧光增强蛋白序列的质粒pEGFPC1-Cas3共转染293细胞,流式细胞仪分析荧光强度;pShuttleH1-siCas3线性化后转化到含pAdEasy-1的BJ5183感受态细菌中获取重组质粒,脂质体转染293细胞获取重组腺病毒Ad-siCas3;TCIDs.法测定病毒滴度;感染海马神经元,观察内毒素诱导神经元caspase-3 mRNA的表达及凋亡情况.结果 目的基因序列正确,pShuttleH1-siCas3可明显减弱pEGFPC1-Cas3绿色荧光,Ad-siCas3滴度为1.06×1010 pfu/ml.转染病毒的海马神经元内毒素诱导的凋亡效应及caspase-3 RNA的表达明显减弱.结论 成功地构建了表达大鼠caspase-3 siRNA腺病毒,具有良好的抑制神经元凋亡作用.
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| 关 键 词： | 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 RNA干扰 腺病毒科 细胞凋亡 神经元 |
Construction of adenovirus expressing caspase-3 siRNA and its effect on neuronal apoptosis |
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