| 人AQP5真核表达质粒的构建及其在胃癌细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 黄永红,徐方云,吕农华. 人AQP5真核表达质粒的构建及其在胃癌细胞中的表达[J]. 重庆医学, 2013, 0(4): 407-409 |
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| 作者姓名： | 黄永红 徐方云 吕农华 |
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| 作者单位： | 南昌大学第一附属医院消化内科;南昌大学基础医学院病理生理教研室 |
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| 摘 要： | 目的构建人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒,观察水通道蛋白5(AQP5)基因在胃癌AGS细胞中的稳定表达。方法采用基因重组技术将人AQP5cDNA插入真核表达载体pcDNA3.1/myc-His,构建人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒。脂质体介导空载体pcDNA3.1/myc-His和表达质粒pcDNA3.1-AQP5/myc-His分别转染人胃癌AGS细胞株,G418筛选,挑取阳性克隆,扩大培养,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)分别检测AQP5mRNA和蛋白表达。结果双酶切和基因测序结果均证实人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒构建成功。AQP5转染组与空白对照组、空载体组比较,AQP5mRNA表达显著增加(P<0.05),AQP5蛋白表达显著上调(P<0.05)。结论成功构建人AQP5真核表达质粒并获得稳定表达AQP5基因的胃癌AGS细胞系,为进一步研究AQP5蛋白对胃癌恶性表型的影响奠定实验基础。
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| 关 键 词： | 胃肿瘤 水通道蛋白质5 转染 |
Construction of eukaryotic expression plasmid for human AQP5 and its expression in gastric cell line AGS |
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| Huang Yonghong,Xu Fangyun,Lv Nonghua. Construction of eukaryotic expression plasmid for human AQP5 and its expression in gastric cell line AGS[J]. Chongqing Medical Journal, 2013, 0(4): 407-409 |
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| Authors: | Huang Yonghong Xu Fangyun Lv Nonghua |
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| Affiliation: | 1(1.Department of Gastroenterology,the First Affiliated Hospital of Nanchang University, Nanchang,Jiangxi 330006,China;2.Department of Pathophysiology,the Basic Medical College of Nanchang University,Nanchang,Jiangxi 330006,China) |
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| Abstract: | |
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