摘 要: | 目的探讨外泌体(EXO)负载的抗新生血管短肽KV11在角膜新生血管(CNV)中的作用及其机制。方法利用EXO锚定肽CP05将KV11结合到血管内皮来源的EXO膜表面, 形成EXO-KV11。通过Apogee纳米流式分析EXO负载KV11的效率和最佳浓度比。选取8周龄SPF级健康雄性SD大鼠100只, 其中10只大鼠不做任何处理, 为正常对照组;其余大鼠在建立碱烧伤诱导CNV大鼠模型后, 采用随机数字表法随机将大鼠分为EXO-KV11组、KV11组和生理盐水组, 每组各30只。从碱烧伤后第1天开始每隔1天, 各组分别结膜下注射100 μl EXO-KV11(25 μg)、KV11(25 μg)或生理盐水。观察第1、4、7、14天时CNV的生成情况;采用荧光素心室灌注、角膜血管造影法计算CNV面积;采用苏木精-伊红染色法观察各组CNV管腔数量;采用免疫组织化学法检测角膜组织中CD31的表达分布;采用Western blot法检测电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)和内质网应激、自噬及凋亡相关蛋白的表达水平。结果 Apogee流式分析确定KV11与EXO最佳浓度比为4∶1, EXO负载KV1...
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