长期传代培养对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

背景：人骨髓间充质干细胞体外长期传代培养后是否能保持其生物学特性、能量代谢方式和多向分化潜能等仍存在争议，有待于进一步全面系统研究。目的：观察体外长期传代培养对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响。方法：人骨髓间充质干细胞体外培养至第5,10,15代，MTT法检测细胞增殖能力，流式细胞仪检测细胞周期；成脂、成骨、成软骨诱导分化检测细胞多向分化潜能；划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力；能量代谢分析仪检测细胞线粒体氧化磷酸化和糖酵解能力；β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况；Western blot检测细胞衰老标记蛋白p21、p16、p53表达。结果与结论：第5,10,15代骨髓间充质干细胞均呈贴壁生长，第15代细胞体积增大，增殖能力降低，S期细胞百分比减少(P <0.05)；随着传代次数的增加，细胞划痕愈合和侵袭能力逐渐减弱(P <0.05)，成脂、成骨和成软骨分化潜能未见显著性差异，细胞线粒体氧化磷酸化和糖酵解能力逐渐降低(P <0.05)。随着传代次数的增加，β-半乳糖苷酶染色阳性细胞增多(P <0.05)，衰老标记蛋白p21、p16、p53...