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红色荧光-VEGF_(165)融合蛋白载体在细胞内的定位和表达
引用本文:邹海波,安洪,蒋电明,刘建伟,周亚莉.红色荧光-VEGF_(165)融合蛋白载体在细胞内的定位和表达[J].创伤外科杂志,2004(3).
作者姓名:邹海波  安洪  蒋电明  刘建伟  周亚莉
作者单位:重庆医科大学附属第一医院骨科 重庆400016 (邹海波,安洪,蒋电明,刘建伟),重庆医科大学医学检验系 重庆400016(周亚莉)
摘    要:目的 构建在哺乳动物细胞中表达人VEGF1 65(hVEGF1 65)红色荧光蛋白 (RFP)的融合表达载体。方法 根据已知的人VEGF1 65序列 ,用PCR方法 ,从质粒pUC1 8/VEGF1 65中扩增出去除终止密码子的VEGF1 65片段 ,定向克隆至pDsRed1 N1质粒中。重组质粒经限制性内切酶和DNA序列测定鉴定。以DOTAP为介导 ,将pDsVEGF1 65Red1 N1转染 2 93 T细胞 ,4 8小时后用RT PCR、激光共聚焦显微镜检测VEGF1 65在细胞内表达和分布情况。结果 重组的融合蛋白表达载体经酶切、PCR和DNA序列测定证明构建正确 ,并在2 93 T细胞中表达。报告基因 -红色荧光蛋白在细胞质、细胞核中都有一定的分布。结论 成功构建了pDsVEGF1 65Red1 N1红色荧光蛋白融合表达载体 ,该载体能在哺乳动物细胞中表达 ,为研究VEGF的细胞内定位提供了一个重要而方便的工具

关 键 词:血管内皮细胞生长因子  红色荧光蛋白  真核细胞  基因表达

Localization and expression of red fluorescent protein reporter gene vector containing human vascular endothelial growth factor 165
ZOU Hai bo,An Hong,JIANG Dian ming,et al..Localization and expression of red fluorescent protein reporter gene vector containing human vascular endothelial growth factor 165[J].Journal of Traumatic Surgery,2004(3).
Authors:ZOU Hai bo  An Hong  JIANG Dian ming  
Abstract:
Keywords:vascular endothelial growth factor  red fluorescent protein  eukaryotic cell  gene expression
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