人CCR7真核表达载体构建及对HeLa细胞HLA-I表达的影响 |
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引用本文: | 吴砂,张志丽,左大明,陈政良,邢薇,雷萍,沈关心.人CCR7真核表达载体构建及对HeLa细胞HLA-I表达的影响[J].细胞与分子免疫学杂志,2009,25(6). |
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作者姓名: | 吴砂 张志丽 左大明 陈政良 邢薇 雷萍 沈关心 |
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作者单位: | 1. 南方医科大学基础医学院免疫学教研室,广东,广州,510515 2. 湖北省人民医院检验科 3. 华中科技大学同济医学院免疫学系,湖北,武汉,430030 |
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基金项目: | 广东省自然科学基金博士启动基金,南方医科大学基础医学院院长基金 |
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摘 要: | 目的: 构建人CCR7真核表达载体, 建立稳定转染CCR7的HeLa细胞株, 初步探讨肿瘤细胞表达HLA-I类分子表达改变及相关机制.方法: 从人脾脏cDNA扩增出CCR7, 装入pDsRed2-N1, 脂质体转染HeLa细胞.CCR7配体CCL21作用后, 流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞表达HLA-I的表达, 萤虫素酶报告基因系统检测NF-κB活化.结果: 经PCR、酶切和测序证实, 含CCR7真核表达载体成功构建.G418筛选后获得稳定表达CCR7蛋白的HeLa细胞.FCM证实HeLa细胞表达HLA-I类分子水平增高, 萤虫素酶报告基因系统证实NF-κB活化明显.结论: 成功构建人CCR7真核表达载体, CCR7促进肿瘤细胞表达HLA-I类分子, 诱导肿瘤细胞NF-κB活化.
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关 键 词: | NF-κB |
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