狗牙周膜成纤维细胞的体外培养及其生物学活性

目的：建立一种简便、可靠的牙周膜成纤维细胞(PDLFs)原代分离培养方法，并探讨PDLFs作为牙周组织工程种子细胞的可行性。方法：采用改良组织块法，全麻下拔狗上颌第3切牙，刮取牙周膜，以玻璃片覆盖组织块贴壁替代传统的干燥贴壁法。细胞培养成功后传代，用四甲基偶氮唑蓝比色、免疫组化染色、Von Kossa染色等方法测定其生物学活性。结果：PDLFs原代培养成功率达到89％，免疫组化检测结果为波形丝蛋白阳性，角蛋白阴性，体外培养PDLFs可自然形成矿化结节。结论：采用改良组织块法可以简便、稳定获取原代PDLFs。体外培养PDLFs具有部分成骨样细胞表型特征，可作为牙周组织工程种子细胞来源。 细胞培养