脂多糖诱导大鼠心肌细胞H9c2炎症反应中MAPKs通路的时效关系研究 |
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作者姓名: | 周文娜 欧阳健 王洪伦 |
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作者单位: | 1. 湖州学院;2. 中国科学院西北高原生物研究所中国科学院藏药研究重点实验室 |
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摘 要: | 目的 研究脂多糖诱导大鼠心肌细胞H9c2炎症模型中丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路的时效关系。方法 将H9c2细胞分为对照组和1、10μg·mL-1脂多糖组,分别处理后,采用显微镜观察细胞形态;MTT比色法分析细胞存活率;Griess法检测细胞上清液中NO的含量;DCFH-DA荧光探针法分析细胞内活性氧的水平;Western blot法检测细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、p-JNK、p-ERK、p-P38蛋白的表达水平。结果 与对照组比较,不同剂量脂多糖组H9c2细胞的存活率无明显差异,但细胞形态存在明显差异,NO和活性氧的水平显著升高,TNF-α、p-JNK、p-ERK、p-P38蛋白的表达水平明显上调,且具时间依赖性。结论 脂多糖能显著诱导大鼠心肌细胞H9c2发生炎症反应,且10μg·mL-1作用1 h可作为研究MAPKs通路蛋白表达的最佳评估时间点。
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关 键 词: | 脂多糖 大鼠心肌细胞H9c2 炎症反应 一氧化氮 肿瘤坏死因子α 活性氧 丝裂原活化蛋白激酶 时效关系 |
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