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刚地弓形虫P30(SAG1)基因的克隆与表达
引用本文:张佃波,公茂庆,魏庆宽,李谨,黄炳成,刘克义.刚地弓形虫P30(SAG1)基因的克隆与表达[J].中国病原生物学杂志,2005,18(2):92-95.
作者姓名:张佃波  公茂庆  魏庆宽  李谨  黄炳成  刘克义
作者单位:山东省寄生虫病防治研究所,山东济宁,272033
基金项目:山东省科技厅资助项目。
摘    要:目的构建弓形虫P30基因表达载体并获得重组表达蛋白。方法将弓形虫P30基因的开读框用PCR扩增,NcoⅠ和HindⅢ酶切后,与同样酶切的表达质粒pET30a(+)经T4连接酶连接,然后转化到DH5α中。菌液经PCR扩增和质粒酶切及基因测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS PAGE和Westernblot进行鉴定。结果扩增的P30基因片段为750bp,重组质粒诱导表达产物分子质量单位为30ku,与理论值相符。Westernblot确认重组质粒表达蛋白与小鼠抗弓形虫单克隆抗体(P30McAb)发生特异性反应。结论成功构建重组体并获得弓形虫主要表面抗原P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础。

关 键 词:刚地弓形虫  P30基因  蛋白表达
文章编号:1001-6627(2005)02-0092-04
修稿时间:2004年6月11日

CLONING AND EXPRESSION OF P30 GENE FRAGMENT OF TOXOPLASMA GONDII
ZHANG Dian-bo,GONG Mao-qing,WEI Qing-kuan,LI Jin,HUANG Bing-cheng,LIU Ke-yi.CLONING AND EXPRESSION OF P30 GENE FRAGMENT OF TOXOPLASMA GONDII[J].Journal of Pathogen Biology,2005,18(2):92-95.
Authors:ZHANG Dian-bo  GONG Mao-qing  WEI Qing-kuan  LI Jin  HUANG Bing-cheng  LIU Ke-yi
Institution:ZHANG Dian-bo,GONG Mao-qing,WEI Qing-kuan,LI Jin,HUANG Bing-cheng,LIU Ke-yi~*
Abstract:
Keywords:Toxoplasma gondii  P30 gene  protein expression
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