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亮氨酸对原代培养大鼠骨骼肌细胞葡萄糖摄取及蛋白激酶B表达的影响
引用本文:刘锐,郝丽萍,李想,马俊,刘皓,杨雪锋. 亮氨酸对原代培养大鼠骨骼肌细胞葡萄糖摄取及蛋白激酶B表达的影响[J]. 营养学报, 2011, 33(1)
作者姓名:刘锐  郝丽萍  李想  马俊  刘皓  杨雪锋
作者单位:华中科技大学同济医学院营养与食品卫生学系,武汉,430030
基金项目:国家自然科学基金,湖北省卫生厅人才基金,武汉市科技攻关计划项目
摘    要:目的以原代培养的大鼠骨骼肌细胞为研究对象,观察亮氨酸对骨骼肌细胞及渥曼青霉素(wortmannin)处理后葡萄糖摄取能力及胰岛素信号通路关键分子蛋白激酶B(AKT)表达的影响,从而为探讨亮氨酸与胰岛素抵抗的关系和相关机制提供依据。方法组织块法培养大鼠原代骨骼肌细胞,不同浓度的亮氨酸(0,0.4,2.0,4.0,8.0mmol/L)作用80min或45min,酶法测定基础状态下和胰岛素刺激下葡萄糖摄取能力,确定亮氨酸作用的最佳浓度和作用时间;在此基础上,应用PI-3K抑制剂wortmannin作用30min,测定葡萄糖摄取能力,Western blot检测AKT及磷酸化AKT表达水平。结果胰岛素刺激状态下,2mmol/L亮氨酸作用45min骨骼肌细胞葡萄糖摄取能力达最大;2mmol/L亮氨酸干预可改善wortmannin对胰岛素刺激下骨骼肌细胞葡萄糖摄取的抑制作用,显著增强胰岛素信号传导关键分子pSer473 AKT的表达。结论亮氨酸可改善骨骼肌细胞胰岛素抵抗。这种作用不完全依赖于PI-3K胰岛素信号传导通路,并且可能与其增强AKT磷酸化水平有关。

关 键 词:亮氨酸  葡萄糖摄取  蛋白激酶B  渥曼青霉素

EFFECT OF LEUCINE ON GLUCOSE UPTAKE AND AKT EXPRESSION IN PRIMARY CULTURED SKELETAL MUSCLE CELLS OF RATS
LIU Rui,HAO Li-ping,LI Xiang,MA Jun,LIU Hao,YANG Xue-feng. EFFECT OF LEUCINE ON GLUCOSE UPTAKE AND AKT EXPRESSION IN PRIMARY CULTURED SKELETAL MUSCLE CELLS OF RATS[J]. Acta Nutrimenta Sinica, 2011, 33(1)
Authors:LIU Rui  HAO Li-ping  LI Xiang  MA Jun  LIU Hao  YANG Xue-feng
Affiliation:LIU Rui,HAO Li-ping,LI Xiang,MA Jun,LIU Hao,YANG Xue-feng(Department of Nutrition and food Health,Tongji Medical College,Hua Zhong University of Science and Technology,Wu Han 430030,China)
Abstract:Objective To examine the effects of leucine on glucose uptake and AKT(PKB,protein kinase B) expression in normal and wortmannin treated primary cultured skeletal muscle cells of rats.Method Exposure to different doses of leucine(0,0.4,2,4,8 mmol/L) with or without insulin(100 nmol/L) for 80 min or 45min,2-deoxyglucose uptake of skeletal muscle cells was determined by nonradioisotope enzymatic microplate assay.Cells were pretreated with or without wortmannin for 30 min,then incubated with 2 mmol/L leucine or...
Keywords:leucine  glucose uptake  AKT  wortmannin  
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