蜕皮甾酮对人脐带间充质干细胞冻存复苏后生物学活性的影响 |
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作者姓名: | 冯长江 吴旭 马奎 杨思明 李军 吴霞 付小兵 |
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作者单位: | 冯长江 (南方医科大学南方医院胸心血管外科,广东广州510515) ; 吴旭 (解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室,北京100048) ; 马奎 (南方医科大学南方医院胸心血管外科,广东广州,510515) ; 杨思明 (解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室,北京,100048) ; 李军 (解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室,北京,100048) ; 吴霞 (南方医科大学南方医院胸心血管外科,广东广州,510515) ; 付小兵 (南方医科大学南方医院胸心血管外科,广东广州,510515) ; |
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基金项目: | 广东省科技计划项目,中国博士后科学基金面上资助项目 |
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摘 要: | 目的:研究体外条件下蜕皮甾酮(EDS)对冻存复苏后人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)生物学活性的影响。方法:hUCMSCs采用梯度冷冻技术冻存,6个月后复苏,扩增、传代,分3组培养:空白对照组用普通培养基培养;低剂量EDS组在普通培养基中加入100μg/mlEDS;高剂量EDS组在普通培养基中加入200μg/mlEDS。显微镜下观察细胞形态,10d时计算克隆形成能力,绘制细胞生长0~7d的细胞生长曲线,流式细胞仪鉴定hucMscs的细胞表面特异标记(CD34、CD45、CD29、CD105),油红0染色及茜素红染色观察huCMSCs向脂肪细胞、成骨细胞分化的能力。结果:两EDS组克隆形成率约为75%,空白对照组约为40%。生长曲线显示两EDS组增殖速度较空白对照组快,但两EDS组增殖速度相近。流式检测结果显示两EDS组的CD29、CD105阳性率明显高于空白对照组,CD34、CD45里阴性表达,其表达明显低于空白对照组(P〈0.05),两EDS组之间差异无统计学意义;成骨、成脂分化能力检测发现,各组细胞均能够向脂肪细胞、成骨细胞分化,而高剂量EDS组细胞在未加诱导培养基的情况下仍出现向成骨细胞分化的趋势。结论:在一定浓度范围内,EDS对细胞复苏后恢复细胞活性以及提高存活率方面具有积极作用,但是较高浓度的EDS有诱导细胞向成骨细胞方向分化的趋势。
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关 键 词: | 蜕皮甾酮 脐带间充质干细胞 冻存 复苏 |
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