蜕皮甾酮对人脐带间充质干细胞冻存复苏后生物学活性的影响

目的：研究体外条件下蜕皮甾酮（EDS）对冻存复苏后人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）生物学活性的影响。方法：hUCMSCs采用梯度冷冻技术冻存，6个月后复苏，扩增、传代，分3组培养：空白对照组用普通培养基培养；低剂量EDS组在普通培养基中加入100μg／mlEDS；高剂量EDS组在普通培养基中加入200μg／mlEDS。显微镜下观察细胞形态，10d时计算克隆形成能力，绘制细胞生长0～7d的细胞生长曲线，流式细胞仪鉴定hucMscs的细胞表面特异标记（CD34、CD45、CD29、CD105），油红0染色及茜素红染色观察huCMSCs向脂肪细胞、成骨细胞分化的能力。结果：两EDS组克隆形成率约为75％，空白对照组约为40％。生长曲线显示两EDS组增殖速度较空白对照组快，但两EDS组增殖速度相近。流式检测结果显示两EDS组的CD29、CD105阳性率明显高于空白对照组，CD34、CD45里阴性表达，其表达明显低于空白对照组（P〈0．05），两EDS组之间差异无统计学意义；成骨、成脂分化能力检测发现，各组细胞均能够向脂肪细胞、成骨细胞分化，而高剂量EDS组细胞在未加诱导培养基的情况下仍出现向成骨细胞分化的趋势。结论：在一定浓度范围内，EDS对细胞复苏后恢复细胞活性以及提高存活率方面具有积极作用，但是较高浓度的EDS有诱导细胞向成骨细胞方向分化的趋势。