兔抗人免疫相关鸟苷三磷酸酶基因多克隆抗体的制备与鉴定 |
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引用本文: | 赵桂宪,吴志英,陈万金,林毅,王柠. 兔抗人免疫相关鸟苷三磷酸酶基因多克隆抗体的制备与鉴定[J]. 中国临床神经科学, 2009, 17(6): 601-605 |
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作者姓名: | 赵桂宪 吴志英 陈万金 林毅 王柠 |
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作者单位: | 1. 福建医科大学附属第一医院神经内科,350005;复旦大学附属华山院神经内科,200040 2. 福建医科大学附属第一医院神经内科,350005 |
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基金项目: | 福建省自然科学基金重点项目,福建省卫生厅青年科研基金 |
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摘 要: | 目的:表达人免疫相关鸟苷三磷酸酶基因(IRGM)a全长融合蛋白,制备高质量的免抗人IRGM多克隆抗体。方法:将IRGMa全长cDNA片段分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-2和真核表达载体pCMV-myc,测序验证序列正确。在大肠埃希菌E.coliBL21中表达IRGMa/GST融合蛋白,用纯化的可溶性IRGMa/GST融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗人IRGM抗体,采用ELISA、免疫印迹和竞争抑制等多种方法验证其敏感度和特异度。结果:自制的兔抗人IRGM多克隆抗体的特异度和敏感度均较高,效价更高于市售抗体。结论:成功制备了免抗人IRGM多克隆抗体,为进一步的功能研究打下基础。
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关 键 词: | 免疫相关鸟苷三磷酸酶基因 融合蛋白 多克隆抗体 |
Preparation and Identification of the Rabbit Anti-human Immune-related Gene Guanosine Triphosphate Polyclonal Antibody |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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