含有生肌液的组织工程皮肤修复兔皮肤缺损

背景：在皮肤开放创面上进行缺损修复与重建是组织修复领域的研究焦点。构建含有中药的组织工程皮肤修复创面缺损的研究并不多见。目的：将含有生肌液的皮肤支架与自体皮肤细胞复合，构建含药组织工程皮肤，修复兔皮肤缺损。设计：自体对照动物实验。单位：实验于2005—02／08在天津市天津医院骨科研究所细胞工程室完成。材料：同窝大耳白兔8只，体质量1．6～1．8kg。自行提取生肌液（1500g／L），成分为当归、生地、龟板、象皮、血余、生石膏、炉甘在；明胶-壳聚糖支架材为料天津大学提供，分别修剪成1-3cm直径的圆片，60Co照射灭菌；DR无细胞真皮基质由江苏省启动市医疗用品研究所提供。方法：分离培养兔皮肤细胞，获取第3代角质形成细胞与成纤维细胞。延兔脊柱两侧制作直径1．5cm的圆形全层皮肤缺损创面4个。分为4组，阴性对照组（明胶-壳聚糖支架贴附于创面后滴加生理盐水），人工真皮组（DR无细胞真皮基质贴附于创面后接种细胞悬液），非含药组织工程皮肤组（明胶壳聚糖支架贴附于创面后接种细胞悬液），含药组织工程皮肤组（生肌液明胶-壳聚糖支架贴附于创面后接种细胞悬液）。主要观察指标：①术后13d测量剩余创面面积。②术后7d、10d取材行组织学与免疫组织化学染色检测。结果：①术后13d各组创面面积均有不同程度的缩小，剩余面积阴性对照组〉人工真皮组〉非含药组织工程皮肤组〉含药组织工程皮肤组，非含药组织工程皮肤组、含药组织工程皮肤组与阴性对照组比较差异有显著性意义（P〈0.05）。②术后10d，阴性对照组、人工真皮组、非含药组织工程皮肤组均有炎性肉芽组织增生，无表皮组织形成；含药组织工程皮肤组形成接近正常的上皮组织及幼稚的真皮组织。非含药组织工程皮肤组与人工真皮组BrdU标记弱阳性，含药组织工程皮肤组BrdU标记强阳性。结论：实验采用的方法使种子细胞在含有生肌液的明胶壳聚糖支架上增殖，在体修复皮肤损伤，能够有效扩展皮肤缺损处的覆盖面积，缩短皮肤缺损的愈合时间。