| 靶向Bi-1基因的重组慢病毒载体构建及其在NIH3T3细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 李祥勇,罗海清,林观平,周克元. 靶向Bi-1基因的重组慢病毒载体构建及其在NIH3T3细胞中的表达[J]. 医学研究生学报, 2010, 23(12) |
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| 作者姓名： | 李祥勇 罗海清 林观平 周克元 |
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| 基金项目： | 广东省重点扶持学科项目，广东省科技计划项目 |
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| 摘 要： | 目的 慢病毒载体技术已被广泛应用于基因功能分析、信号转导通路和基因治疗的研究.文中应用慢病毒系统构建凋亡抑制基因Bi-1的慢病毒表达载体并检测其在NIH3T3细胞中的表达,为后续的以Bi-1基因为靶点的肿瘤基因治疗研究奠定基础. 方法 根据慢病毒表达载体酶切位点的特征序列设计PCR扩增引物并扩增人Bi-1cDNA,并采用DNA重组技术定向克隆至pLCMV-IG质粒中,构建重组慢病毒载体质粒pLCMV-IG-Bi-1,经PCR、双酶切和测序鉴定后,包装慢病毒感染至小鼠成纤维细胞株NIH3T3中,RT-PCR及Western-blot 分别检测NIH3T3细胞中Bi-1基因和蛋白的表达. 结果 PCR、酶切及测序结果 表明重组慢病毒载体构建成功;NIH3T3细胞感染重组载体包装的慢病毒后出现明显的Bi-1基因高表达. 结论 成功构建靶向Bi-1基因的重组慢病毒载体,为进一步研究Bi-1基因对细胞生长转化的影响提供了实验依据.
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| 关 键 词： | Bi-1 重组慢病毒载体 NIH3T3 |
Construction of recombinant lentiviral expression vector targeting human Bax inhibitor-1 gene and its expression in NIH3T3 cells |
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| LI Xiang-yong,LUO Hai-qing,LIN Guan-pin,ZHOU Ke-yuan. Construction of recombinant lentiviral expression vector targeting human Bax inhibitor-1 gene and its expression in NIH3T3 cells[J]. Bulletin of Medical Postgraduate, 2010, 23(12) |
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| Authors: | LI Xiang-yong LUO Hai-qing LIN Guan-pin ZHOU Ke-yuan |
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