| SV40LT抗原介导的人源性肝细胞系的构建 |
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| 引用本文： | 李君,李兰娟,曹红翠,徐威,俞云松,盛吉芳,陈亚岗.SV40LT抗原介导的人源性肝细胞系的构建[J].中华传染病杂志,2004,22(3):149-153. |
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| 作者姓名： | 李君 李兰娟 曹红翠 徐威 俞云松 盛吉芳 陈亚岗 |
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| 作者单位： | 310003,杭州,浙江大学医学院附属第一医院生物人工肝实验室 |
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| 基金项目： | 国家 8 63计划项目(200 3AA2 0 5 15 0 )，国家自然科学基金资助项目(3 0 170 2 5 5 )，浙江省“新世纪151人才工程”项目，浙江省卫生厅优秀青年人才基金项目(2001.QN0 1)，浙江省中医管理局青年人才基金项目 (2 0 0 2C0 3 7)，浙江省科技厅重点项目(0 2 110 3 12 |
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| 摘 要： | 目的 建立人源性肝细胞系 ,为生物人工肝和肝细胞移植等提供合适的细胞源。方法 利用SV4 0LTag基因和真核表达载体pcDNA3.1( - )经脂质体转染至来源于 2 5岁男性脑死亡者供肝的原代培养细胞 ,使其永生化 ,进一步鉴定其形态学特征和生物学功能。结果 经G4 1870 0～30 0 μg/ml筛选 ,4 2d后获一抗G4 18肝细胞系。该细胞系呈单层贴壁、上皮细胞样形态生长 ,体外培养可无限传代 ,具有分泌白蛋白 (ALB)、丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天冬氨酸氨基转移酶 (AST)及乳酸脱氢酶 (LDH)的功能 ,超微结构观察发现 ,转染肝细胞具有原代培养肝细胞的大多数典型特征 ,如较大的细胞核、胞浆内含有丰富的糖原颗粒、大量的线粒体和粗面内质网等。经逆转录聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹检测 ,转染肝细胞的ALBmRNA阳性和细胞色素P4 5 0 2E1阳性。结论 新建人源性肝细胞系与原代培养肝细胞具有类似的形态学特征和生物学功能
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| 关 键 词： | 肝 人工 细胞系 转染 脂质体 蛋白质印迹法 |
| 修稿时间： | 2003年9月10日 |
Establishment of a hepatocyte line from human with SV40LT antigen |
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| LI Jun,LI Lan juan,CAO Hong cui,et al..Establishment of a hepatocyte line from human with SV40LT antigen[J].Chinese Journal of Infectious Diseases,2004,22(3):149-153. |
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| Authors: | LI Jun LI Lan juan CAO Hong cui |
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| Institution: | LI Jun,LI Lan juan,CAO Hong cui,et al. Lab of Bioartificial Liver,1 st Affiliated Hospital of Zhejiang University Medical School,Hangzhou 310003,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Liver artificial Cell line Transfection Liposomes Bloting Western |
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