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黄花蒿HDS基因的克隆与功能分析
引用本文:张祖荣,廖志华,彭梅芳. 黄花蒿HDS基因的克隆与功能分析[J]. 医学教育探索, 2012, 43(1): 148-154
作者姓名:张祖荣  廖志华  彭梅芳
作者单位:1.重庆文理学院 生命科学系,重庆 402168 2.西南大学生命科学学院 三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆 400715
基金项目:重庆市教委自然科学研究资助项目(kj071204)
摘    要:目的 克隆获得黄花蒿MEP途径中必需关键酶——羟甲基丁烯基-4-磷酸合成酶基因(HDS),并进行生物信息学分析和功能互补分析研究。方法 对已知的其他种子植物HDS基因的核苷酸序列进行多重序列比对,选取保守区域设计简并引物,利用同源扩增和cDNA末端快速扩增技术从黄花蒿中获得目的基因;利用BLAST进行序列比对,ORF Finder寻找开放阅读框,并用MEGA3.0中的临位相联法构建进化树。结果 得到1条长2 324 bp的HDS cDNA序列,其ORF框长1 854 bp,编码617个氨基酸残基的蛋白;生物信息学分析显示,黄花蒿HDS基因AaHDS与其他种子植物来源的HDS高度同源;功能互补分析表明,AaHDS能互补突变菌株Escherichia coli MG1655 ara<>HDS中缺失的HDS功能,使突变菌株恢复生长,证明AaHDS具有典型的HDS基因功能。结论 首次克隆获得黄花蒿HDS基因,为青蒿素的代谢工程研究提供相应的基础。

关 键 词:黄花蒿;羟甲基丁烯基-4-磷酸合成酶基因;基因克隆;生物信息学分析;青蒿素

Cloning and function analyses of HDS gene from Artemisia annua
ZHANG Zu-rong,LIAO Zhi-hu,PENG Mei-fang. Cloning and function analyses of HDS gene from Artemisia annua[J]. Researches in Medical Education, 2012, 43(1): 148-154
Authors:ZHANG Zu-rong  LIAO Zhi-hu  PENG Mei-fang
Affiliation:1.Department of Life Science, Chongqing University of Arts and Sciences, Chongqing 402168, China 2.Key Laboratory of Eco-environments in Three Gorges Reservoir Region, Ministry of Education, School of Life Sciences, Southwest University, Chongqing 400715, China
Abstract:
Keywords:Artemisia annua L.   HDS   gene cloning   bioinformatic analysis   artemisinin
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