| 摘 要： | 采用可导致肢体畸形的已知致畸物N－甲基－N'－硝基－N－甲基亚硝基胍（MNNG）作为受试物，诱发小鼠肢体的异常发育表型，然后用抑制消减杂交技术（SSH）筛选该模型畸形肢体和相应正常器官的差异基因。结果发现，小鼠妊娠第12天一次腹腔注射给予40mg/kg MNNG可诱发的胎鼠肢体畸形，发生率高。肢体畸形以活胎计的发生率为33.7%，以窝计为81．8％，肢体畸形占畸胎鼠的构成比为100％，且以短指（趾）和缺指（趾）最为常见，其次还有多指（趾）和短肢等。畸形发生的部位存在左右及前后不对称性，四肢畸形的发生率和畸形严重程度依次为左后＞左前＞右后＞右前。特别是发现并证实在体形态所见短肢是径腓骨缺失所致；肋骨的异常发育也存在明显的左右不对称性，这些发现尚未见国内外有报道。应用SSH技术和点杂交等技术对孕期第18天的MNNG诱发的小鼠胚胎畸形肢体和相应对照组正常肢体的差异表达基因进行筛选，共得到25个差异片断，对其中的12个进行测序。GeneBank查询比对之后发现，1条为已知基因，即小鼠基因Pex3，另外3条分别与小鼠melanoma X-actin(Actx)mRNA、小鼠端粒酶结合蛋白p23和人胶原Ⅰ型alphal基因同源（但blastx/nr查询结果不支持该结论），视为可能已知基因；其余6条序列分别与小鼠肌肉或小鼠8－12天胚胎不同器官肌肉 cDNA序列近似，视为未知基因，MNNG诱导的小鼠GD18天胚胎肢体畸形差异表达基因大多数是一些肌肉发育基因，而且分别与正常8－12天胚胎不同器官肌肉的cDNA序列一致，这些片段在畸形肢体差异表达，提示MNNG可能是破坏了这些基因的正常表达程序，因而导致了肢体组织发生异常，尽管目前尚无法判断这些片断是否是该畸形发生的关键基因片断。该研究为今后开展肢体的异常发育分子机制和其他类型的异常发育机制研究了提供了一条新思路。
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