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酵母双杂交技术筛选细胞极化蛋白PALS1的结合蛋白
引用本文:高雪敏,刘晓颖,张庆慧,戴寒晶,范礼斌. 酵母双杂交技术筛选细胞极化蛋白PALS1的结合蛋白[J]. 安徽医科大学学报, 2007, 42(2): 154-157
作者姓名:高雪敏  刘晓颖  张庆慧  戴寒晶  范礼斌
作者单位:安徽医科大学基础医学院生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学基础医学院生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学基础医学院生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学基础医学院生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学基础医学院生物学教研室,合肥,230032
基金项目:安徽省教育厅自然科学基金项目(编号:2003kj189),安徽医科大学博士科研基金项目
摘    要:目的筛选细胞极化蛋白PALS1的结合蛋白,进一步探讨PALS1的功能及其分子机制。方法将PALS1的全长cDNA序列克隆到载体pGBKT7中,重组的pGBKT7-PALS1质粒转入酵母AH109细胞,细胞置于SD/-Trp培养基上生长,阳性细胞再用Hela细胞的cDNA文库质粒转化,生长于SD/-Trp/-Leu/-His/X-α-gal,显蓝色的克隆为阳性。阳性克隆细胞中的DNA被抽提后转化细菌细胞,然后抽提DNA进行酶切分型。合适的类型测序后进行BLAST检索分析。结果筛选到了13个阳性克隆,其中有2个是已知蛋白的基因即ATRAP和GLT28D1。结论利用酵母双杂交系统成功克隆了PALS1的结合蛋白的基因,为进一步研究PALS1蛋白的功能提供了有益的启示。

关 键 词:酵母菌  双杂交系统技术
文章编号:1000-1492(2007)02-0154-04
收稿时间:2007-01-05
修稿时间:2007-01-05

Screening of proteins interacting with cellular polar protein PALS1 by yeast two-hybrid system
Gao Xuemin, Liu Xiaoying, Zhang Qinghui, et al. Screening of proteins interacting with cellular polar protein PALS1 by yeast two-hybrid system[J]. Acta Universitis Medicinalis Anhui, 2007, 42(2): 154-157
Authors:Gao Xuemin   Liu Xiaoying   Zhang Qinghui   et al
Affiliation:Dept of Biology, Anhui Medical University, Hefei 230032
Abstract:
Keywords:saccharomycetales  two-hybrid system technieues
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