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人心肌热休克蛋白27基因克隆及其高表达对大鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用
引用本文:刘莉,张小进,姜苏蓉,高翔,丁国宪,程蕴琳. 人心肌热休克蛋白27基因克隆及其高表达对大鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用[J]. 中华老年医学杂志, 2004, 23(12): 879-882
作者姓名:刘莉  张小进  姜苏蓉  高翔  丁国宪  程蕴琳
作者单位:1. 210029,南京医科大学第一附属医院老年医学科
2. 南京大学模式动物中心
基金项目:江苏省卫生厅“135”工程重点学科基金项目(13514),南京医科大学创新基金(CX2003018)
摘    要:目的克隆和重组人心肌热休克蛋白27(HSP27)基因,观察HSP27高表达对大鼠心肌细胞氧化应激的影响。方法将RTPCR获得的人心肌HSP27基因全长cDNA,重组入质粒载体pCDNA31 。将重组体pCDNA31 /HSP27转染大鼠心肌细胞系H9c2,经G418选择性培养获得稳定转染细胞系;观察HSP27高表达对H2O2诱导的乳酸脱氢酶(LDH)释放和细胞凋亡的影响。结果(1)pCDNA31 /HSP27在293T和H9c2中表达良好;(2)0、100、250、500、1000μmol/LH2O2引起的LDH释放,在HSP27高表达组和野生型组分别为0396±0017和0390±0009、0437±0014和0416±0015、0471±0018和0417±0009、0505±0030和0657±0022、0547±0027和0661±0011(均为P<0001);(3)150μmol/LH2O2诱导的细胞凋亡在HSP27高表达和野生型组分别为总细胞数的(10693±1122)%和(4027±1628)%,P<001。结论人心肌HSP27基因被成功克隆和重组,其在大鼠心肌细胞系H9c2的高度表达显著保护了该细胞的过氧化损伤。

关 键 词:热休克蛋白质类  基因  转染  氧化性应激  脱噬作用
修稿时间:2004-01-19

Molecular cloning of human heat shock protein 27 and its protective effects on oxidative damage induced by H2O2 in rat cardiomyocte cell line H9c2
LIU Li,ZHANG Xiao jin,JIANG Su rong,GAO Xiang,Ding guo xian,CHENG Yun lin. Molecular cloning of human heat shock protein 27 and its protective effects on oxidative damage induced by H2O2 in rat cardiomyocte cell line H9c2[J]. Chinese Journal of Geriatrics, 2004, 23(12): 879-882
Authors:LIU Li  ZHANG Xiao jin  JIANG Su rong  GAO Xiang  Ding guo xian  CHENG Yun lin
Affiliation:LIU Li,ZHANG Xiao jin,JIANG Su rong,GAO Xiang,Ding guo xian,CHENG Yun lin. Department of Gerontology,First Affiliated Hospital,Nanjing Medical University,Nanjing 210029,China
Abstract:
Keywords:Heat shock proteins  Genes  Transfection  Oxidative stress  Apoptosis
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