釉成熟蛋白amelotin在大肠杆菌中的表达和纯化 |
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引用本文: | 孙岩,林婷婷,张娟娟,曹雪梅,韩婷婷,李东亮,李武修,高玉光.釉成熟蛋白amelotin在大肠杆菌中的表达和纯化[J].牙体牙髓牙周病学杂志,2009,19(1). |
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作者姓名: | 孙岩 林婷婷 张娟娟 曹雪梅 韩婷婷 李东亮 李武修 高玉光 |
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作者单位: | 潍坊医学院口腔医学院口腔医学研究所,山东 潍坊,261042
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基金项目: | 国家自然科学基金,山东省教育厅重点项目 |
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摘 要: | 目的:观察釉成熟蛋白(amelotin)基因聚合酶链反应产物在大肠杆菌中的表达,并获得纯化的釉成熟蛋白.方法:利用His融合蛋白表达载体pET32a(+)转化大肠杆菌BL21,通过异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,并改变诱导时间、温度、IPTG浓度来优化表达条件,然后在优化的条件下进行大量表达并收菌;His镍柱纯化表达的蛋白.聚丙烯酰胺凝胶电泳分析蛋白表达、纯化情况.结果:电泳结果分析表明:amelotinPCR扩增产物在大肠杆菌中获得高效表达,大小约4×104,纯化得到的amelotin纯度较高.结论:成功得到纯化的amelotin,为进一步制备抗体奠定基础.
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关 键 词: | 小鼠 表达 大肠杆菌 纯化 |
Exprssion and purification of mouse amelotin in Escherichia coli |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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