| 羧基荧光素琥珀酰亚胺酯标记肿瘤细胞及其在细胞毒检测中的价值 |
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| 引用本文： | 段秀梅,谭岩,方艳秋,杨广民,王晓祺,刘晓琳,刘力华,许淑芬.羧基荧光素琥珀酰亚胺酯标记肿瘤细胞及其在细胞毒检测中的价值[J].中华检验医学杂志,2006,29(10):935-938. |
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| 作者姓名： | 段秀梅 谭岩 方艳秋 杨广民 王晓祺 刘晓琳 刘力华 许淑芬 |
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| 作者单位： | 1. 130021,长春市,吉林大学第一医院中心研究室
2. 吉林省人民医院 |
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| 基金项目： | 吉林省科技厅重点资助项目（20050402-3,20040401-5）;吉林省科技厅国际合作资助项目（20040707-2）;2004年长春市科技局计划资助项目（2004218） |
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| 摘 要： | 目的探讨化学染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯（CFDA-SE）标记肿瘤细胞的最佳条件及其在细胞毒检测中的价值。方法用不同浓度的CFDA-SE标记K562（人红白血病细胞）、YAC-1（小鼠淋巴瘤细胞）、A375（人乳腺癌细胞）、MCF-7（人黑色素瘤细胞）不同肿瘤细胞系，并检测其0—24h的荧光强度，观察荧光强度变化的时间动力学，选择CFDA-SE标记细胞的最佳浓度；CFDA-SE标记细胞后孵育时间为1—6h，再用DNA染料碘化丙啶（PI）标记，流式细胞仪分析CFDA-SE和PI双标记细胞，并计算细胞死亡率，研究CFDA-SE对细胞的毒性。CFDA-SE标记时间分别为5、6、7、8、10、15min，测定标记不同时间的荧光强度和细胞的死亡率，选择最佳标记时间；用CFSE在最佳条件下标记靶细胞进行细胞毒检测实验。结果对于不同肿瘤细胞系，CFDA-SE标记的最佳浓度不同；CFDA-SE对细胞没有毒性，死亡率低于5％；最佳标记时间为8min。人外周血单个核细胞和BALB／c鼠脾淋巴细胞对肿瘤细胞K562、YAC-1均表现出杀伤活性，杀伤百分率随效靶比和共孵育时间的增加而增加。最佳效靶比为50：1—25：1，共孵育时间为2—4h。结论CFDA-SE具有标记细胞稳定，能用于细胞培养时间较长的研究，不影响细胞功能，适用于流式细胞仪检测细胞毒实验的优点，是一种很好的标记细胞的荧光素染料。
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| 关 键 词： | 流式细胞术 细胞毒 羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯 |
| 收稿时间： | 2005-11-01 |
| 修稿时间： | 2005年11月1日 |
Fluorescent dye of CFSE used for labeling tumor cells and determining cytotoxicity |
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| DUAN Xiu-mei,TAN Yan,FANG Yan-qiu,YANG Guang-min,WANG Xiao-qi,LIU Xiao-lin,LIU Li-hua,XU Shu-fen.Fluorescent dye of CFSE used for labeling tumor cells and determining cytotoxicity[J].Chinese Journal of Laboratory Medicine,2006,29(10):935-938. |
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| Authors: | DUAN Xiu-mei TAN Yan FANG Yan-qiu YANG Guang-min WANG Xiao-qi LIU Xiao-lin LIU Li-hua XU Shu-fen |
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| Institution: | Central Laboratory of the First Hospital ,JiLin University , Changchun ,130021 ,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Flow cytometry Cytotoxicity Carbexyfluorescein diaccete succinimidyl ester |
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