高糖对人脐静脉内皮细胞NADPH 氧化酶表达和活性氧生成的影响

目的：探讨高糖对内皮细胞活性氧生成和NADPH氧化酶(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase， NOX)表达的影响。方法：本实验以人脐静脉内皮细胞为研究对象，分为正常对照组、20 mmol/L甘露醇处理4 h高渗 对照组、20 mmol/L葡萄糖处理2 h组、20 mmol/L葡萄糖处理4 h组、20 mmol/L葡萄糖处理6 h组和NOX特异性抑制剂二 苯基碘(diphenylene iodonium，DPI)5 μmol/L预处理0.5 h再加入20 mmol/L葡萄糖处理组(DPI预处理组)。用流式细胞仪 检测各组细胞内活性氧的浓度；反转录聚合酶链反应及Western印迹法分别检测各组细胞内NOX各亚基mRNA和蛋白 的表达变化。结果：1) 与正常对照组相比，20 mmol/L葡萄糖处理2，4 和6 h组活性氧增高(均P<0.05)，而DPI 组活性 氧生成与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)；2) 与正常对照组相比，20 mmol/L葡萄糖处理4 h组NOX4 mRNA 和蛋白的表达明显增加(均P<0.05)，NADPH 氧化酶亚基NOX2，P67phox，P22phox和Rac表达差异均无统计学意义(均 P>0.05)；3)与正常对照组相比，DPI预处理组NOX4，NOX2，P67phox，P22phox和Rac表达差异均无统计学意义(均 P>0.05)。结论：高糖可能通过上调NOX4表达以增加活性氧生成而发挥氧化应激作用。

Effect of high glucose on NADPH oxidase expression and reactive oxygen species generation in human umbilical vein endothelial cells