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乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白结合蛋白1基因的克隆及生物信息学分析
引用本文:李志群,马英骥,成军,王琳,刘妍,洪源,伦永志,李晓东.乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白结合蛋白1基因的克隆及生物信息学分析[J].中华实验和临床感染病杂志(电子版),2008,2(3):162-168.
作者姓名:李志群  马英骥  成军  王琳  刘妍  洪源  伦永志  李晓东
作者单位:北京地坛医院传染病研究所,北京市,100011
摘    要:目的 克隆乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白(MHBs)结合蛋白1(MBP1)基因,构建其真核表达载体并应用生物信息学技术初步探讨其结构及功能.方法 应用PCR技术从HepG2细胞提取的cDNA扩增MBP1基因,选用pGEM-T载体进行TA克隆,通过PCR及限制性酶切分析及测序进行鉴定,并应用生物信息学初步分析其物理化学性质、蛋白质结构域、功能及染色体定位.结果 成功从HepG2细胞提取并逆转录的cDNA扩增出MBP1基因,其编码区为201个核苷酸(nt),编码产物由66个氨基酸残基(aa)组成,进行GenBank同源序列搜寻发现其与已知基因序列和蛋白序列之间无显著同源性,属于未知功能的新基因,并成功进行TA克隆,经酶切和测序验证正确后亚克隆至pcDNATM3.1/myc-His A真核表达载体,生物信息学分析此基因位于第12号染色体,其编码产物分子量为16645.7,理论 pI为 5.33,半衰期为4.4 h(体外哺乳类网状细胞),属于不稳定蛋白,疏水指数较高,含潜在的2个螺旋区域和1个β折叠,预测其可能包含2个蛋白激酶C磷酸化作用位点、2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化作用位点和2个N-豆蔻酰化位点并推测其可能具有不紧密的球蛋白结构,具有信号肽及2个跨膜结构域.结论 发现并成功克隆了乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白结合蛋白1(MBP1)基因,为以后研究此基因的生物学功能及其在HBV损害肝细胞等方面的具体作用提供了新线索.

关 键 词:乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白  克隆  生物信息学分析

Cloning and bioinformatic analysis of gene of hepatocyte protein 1 binding with MHBs
LI Zhi-qun,MA Ying-ji,CHENG Jun,WANG Lin,LIU Yan,HONG Yuan,LUN Yong-zhi,LI Xiao-dong.Cloning and bioinformatic analysis of gene of hepatocyte protein 1 binding with MHBs[J].Chinese Journal of Experimental and Clinical Infectious Diseases(Electronic Version),2008,2(3):162-168.
Authors:LI Zhi-qun  MA Ying-ji  CHENG Jun  WANG Lin  LIU Yan  HONG Yuan  LUN Yong-zhi  LI Xiao-dong
Institution:LI Zhi-qun  MA Ying-ji  CHENG Jun  WANG Lin  LIU Yan  HONG Yuan  LUN Yong-zhi  LI Xiao-dong
Abstract:
Keywords:MHBs protein  Cloning  Bioinformatic analysis  
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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