长链非编码RNA HOTAIR调节PE滋养细胞功能的研究

目的 观察长链非编码RNA(lncRNA) HOX转义反录RNA(HOTAIR)在子痫前期(PE)胎盘组织中的表达及其对滋养细胞HTR 8/SVneo增殖、侵袭及凋亡能力的影响.方法 采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测23例重度PE和23例正常产妇胎盘组织中HOTAIR mRNA表达水平.分别构建其封闭(si-HOTA IR)及过表达载体(pcDNA-HOTAIR),与其对照(si-NC及空载体)分别转染HTR-8/SVneo细胞24～48 h后,qRT-PCR检测细胞中HOTAIR mRNA表达水平验证干扰效率和过表达倍数.采用克隆形成实验和MTT法检测转染后细胞生长增殖能力,Transwell法检测转染后细胞迁移、侵袭能力改变.应用流式细胞技术检测转染后细胞凋亡改变,Western blot检测凋亡相关蛋白表达情况.结果 PE胎盘组织中HOTA IR水平高于正常组织(P＜0.05);pcDNA-HOTAIR组细胞HOTAIR mRNA过表达倍数为51.27; si-HOTAIR组HOTAIR mRNA表达被抑制超过95％,证明过表达和封闭均有效;pcDNA-HOTA IR组细胞增殖能力降低,si-HOTAIR组细胞增殖增加(P＜0.05);pcDNA-HOTAIR组细胞的穿膜细胞数低于对照组,si-HOTAIR组细胞穿膜数高于对照组(P＜0.05);pcDNA-HOTAIR组细胞凋亡增加,si-HOTA IR组凋亡被抑制(P＜ 0.05);pcDNA-HOTAIR组促凋亡蛋白Caspase-3表达增加,而si-HOTAIR组降低;抑凋亡蛋白BCL-2与之相反(P＜0.05).结论 HOTA IR可能通过抑制滋养细胞的增殖和侵袭能力,加速滋养细胞凋亡,从而参与PE的发生发展.

Long Noncoding RNA HOTAIR Modulates the Function of Trophoblast Cells in Pre-eclampsia