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斑点酶免疫渗滤法定量检测雌三醇的实验研究
引用本文:薛添,赵轶君,董洁,李红民.斑点酶免疫渗滤法定量检测雌三醇的实验研究[J].细胞与分子免疫学杂志,2013,29(8).
作者姓名:薛添  赵轶君  董洁  李红民
作者单位:西北大学生命学院,陕西西安,710069
基金项目:陕西省教育厅重点实验室重点科研计划项目,陕西省科技厅社会发展攻关项目
摘    要:目的 制备高特异性的抗雌三醇(E3)单克隆抗体(mAb),建立操作简便、敏感、快速适用于基层使用的E3检测方法.方法 采用活化酯法制备偶联物E3-HRP、E3-BSA、3-OVA.应用mAb技术制备抗E3的mAb;以硝酸纤维素膜为固相载体,抗E3 mAb为包被抗体,建立竞争抑制模式的斑点酶免疫渗滤法.结果 筛选出5株可分泌特异性抗E3 mAb的杂交瘤细胞株.mAb效价为1×105~5×105,亲和常数为5.1×108 ~ 5.2×109 L/mol.检测敏感度为2 ng/mL,检测范围2~200 ng/mL.结论 建立了检测速度快、灵敏度高、应用方便的斑点酶免疫渗滤法.

关 键 词:斑点免疫酶渗滤法  雌三醇  单克隆抗体

Establishment of the dot immunoenzyme filtration assay for quantitive detection of estriol
Abstract:
Keywords:dot immunoenzyme filtration assay (DIEFA)  estriol  monoclonal antibody
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