FBXO6基因真核表达载体的构建及其在HEK293T细胞中的表达 |
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引用本文: | 高媛,冯菁华,陈玕,彭翼飞,郑文岭,马文丽. FBXO6基因真核表达载体的构建及其在HEK293T细胞中的表达[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2013, 29(9) |
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作者姓名: | 高媛 冯菁华 陈玕 彭翼飞 郑文岭 马文丽 |
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作者单位: | 1. 南方医科大学基因工程研究所,广东广州,510515 2. 河南省疾病预防控制中心地方病预防控制所,河南郑州,450016 |
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基金项目: | 南方医科大学"科研启动计划" |
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摘 要: | 目的 构建F盒蛋白6(FBXO6)基因真核表达载体.方法 采用PCR方法合成含有EcoR Ⅰ和Bgl Ⅱ双酶切位点的FBXO6 cDNA全长.分别构建载体pEGFP-C1-FBXO6和pEGFP-C1-anti-FBXO6,采用菌落PCR、双酶切鉴定以及测序证实cDNA片段大小和序列正确.将载体pEGFP-C1-FBXO6和pEGFP-C1-anti-FBXO6分别转染HEK293T细胞,Western blot法检测FBXO6蛋白的表达.结果 pEGFP-C1-FBXO6和pEGFP-C1-anti-FBXO6包含大小、序列正确的FBXO6片段;FBXO6蛋白在转染pEGFP-C1-FBXO6的293T细胞中高表达;在转染pEGFP-C1-anti-FBXO6的HEK293T细胞中表达降低.结论 成功构建FBXO6基因正义真核表达载体pEGFP-C1-FBXO6和反义真核表达载体pEGFP-C1-anti-FBXO6.
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关 键 词: | FBXO6 真核表达载体 |
Construction of eukaryotic expression vector of F-box protein 6 gene and its expression in HEK293T cells |
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Abstract: | |
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Keywords: | F-box protein 6 (FBXO6) eukaryotic expression vector |
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