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白血病细胞系中抑癌基因PTEN启动子区甲基化状态检测及其去甲基化研究
引用本文:李敏,刘航,徐智芳,刘向荣,王洋,饶青,王建祥,王敏. 白血病细胞系中抑癌基因PTEN启动子区甲基化状态检测及其去甲基化研究[J]. 中华血液学杂志, 2008, 29(5): 289-292
作者姓名:李敏  刘航  徐智芳  刘向荣  王洋  饶青  王建祥  王敏
作者单位:1. 北京大学医学部基础医学院药理系,100083
2. 300020 天津,中国医学科学院血液学研究所、血液病医院;实验血液学国家重点实验室
基金项目:天津市科技发展基金,国家高技术研究发展计划(863计划) 
摘    要:目的 探讨抑癌基因PTEN表达沉默的机制及诱导PTEN表达对白血病细胞的作用.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation specific PCR,MSP)检测白血病细胞系HL-60、Nalm-6、Raji、KG-1a、U937、NB4、K562中PTEN基因启动子区域甲基化状态;用甲基化转移酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理白血病细胞,MSP检测甲基化状态的改变、RT-PCR检测PTEN mRNA水平的改变、瑞特染色观察细胞形态学改变、膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)标记染色检测细胞凋亡.结果 检测的白血病细胞系中HL-60、Nalm-6、Raji、KG-1a、U937细胞PTEN基因显示超甲基化状态,而NB4和K562细胞显示低甲基化状态;5-Aza-CdR处理HL-60和Nalm-6细胞后,PTEN基因甲基化降低、mRNA表达水平则逐渐增高,并呈剂量依赖性,细胞出现凋亡现象.结论PTEN基因启动子区异常甲基化可能导致该基因转录表达失活或沉默,甲基化抑制剂可以诱导PTEN表达,并引起白血病细胞凋亡.

关 键 词:白血病  基因,PTEN  甲基化  特异性聚合酶链反应  5-氮-2'-脱氧胞苷

Promoter methylation status of PTEN gene and the effect of induced demethylation in leukemia cell lines
LI Min,LIU Hang,XU Zhi-fang,LIU Xiang-rong,WANG Yang,RAO Qing,WANG Jian-xiang,WANG Min. Promoter methylation status of PTEN gene and the effect of induced demethylation in leukemia cell lines[J]. Chinese Journal of Hematology, 2008, 29(5): 289-292
Authors:LI Min  LIU Hang  XU Zhi-fang  LIU Xiang-rong  WANG Yang  RAO Qing  WANG Jian-xiang  WANG Min
Affiliation:State Key Laboratory of Experimental Hematology, Institute of Hematology and Blood Diseases Hospital, CAMS, Tianjin 300020, China.
Abstract:
Keywords:Leukemia  Gene,PTEN  Methylation  Methylation specific PCR(MSP)  5-Aza-2'-deoxycytidine
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