| 大鼠血清淀粉样物质P(SAP)基因的克隆及重组腺病毒制备 |
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| 引用本文： | 娄小丽,黄英,舒畅,陈洁,罗庆,王莉佳,吴雪郡. 大鼠血清淀粉样物质P(SAP)基因的克隆及重组腺病毒制备[J]. 重庆医科大学学报, 2010, 35(4) |
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| 作者姓名： | 娄小丽 黄英 舒畅 陈洁 罗庆 王莉佳 吴雪郡 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学儿童医院呼吸中心,重庆,400014;重庆医科大学儿童医院呼吸中心,重庆,400014;重庆医科大学儿童医院呼吸中心,重庆,400014;重庆医科大学儿童医院呼吸中心,重庆,400014;重庆医科大学儿童医院呼吸中心,重庆,400014;重庆医科大学儿童医院呼吸中心,重庆,400014;重庆医科大学儿童医院呼吸中心,重庆,400014 |
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| 摘 要： | 目的:制备能够表达大鼠血清淀粉样物质P(Serum amyloid P component,SAP)的重组腺病毒.方法:采用RT-PCR扩增的方法获取大鼠SAP,并将该基因采用定向克隆的方法克隆进入穿梭质粒pAdTraee-TO4中,进一步采用同源重组的方法将该质粒和腺病毒骨架质粒Adeasy-1在大肠杆菌BJ5183中同源重组,然后用脂质体介导的方法导入包装细胞HEK293中,产生表达目的基因的重组腺病毒,扩增病毒后用倍比稀释法测定其滴度.结果:通过PCR技术从重组穿梭质粒和重组腺病毒质粒中扩增出700 bp左右插入片段,测序结果和基因库中的基因序列一致.扩增后的重组腺病毒滴度为2.8×108pfu/ml.结论:成功构建了携带SAP基因的重组腺病毒载体Adeasy-1-SAP.为探讨SAP对肺纤维化的作用及其机制打下基础.
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| 关 键 词： | 血清淀粉样物质P 腺病毒 肺纤维化 分子克隆 |
Cloning of rat serum amyloid P component gene and preparation of its recombinant adenovirus vector |
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