| 桂枝汤含药血清对不同比例Poly(I:C)-LPS组合刺激肺巨噬细胞的干预效应 |
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| 引用本文： | 战晓玲,唐恬,徐文慧,马冀,李兰芳,李沧海,姜廷良.桂枝汤含药血清对不同比例Poly(I:C)-LPS组合刺激肺巨噬细胞的干预效应[J].中国实验方剂学杂志,2018,24(14):84-90. |
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| 作者姓名： | 战晓玲 唐恬 徐文慧 马冀 李兰芳 李沧海 姜廷良 |
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| 作者单位： | 中国中医科学院中药研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（81573838） |
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| 摘 要： | 目的:基于方证相应原理,旨在探索建立一种模拟病毒-细菌共感染的桂枝汤汤证体外细胞模型,为进一步桂枝汤汤证动物模型的建立积累数据。方法:研究桂枝汤含药血清对不同浓度比例的聚肌胞苷酸polyinosinic polycytidylic acid,Poly(I∶C)]与脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)混合物刺激的大鼠肺的巨噬细胞(NR8383)Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)及其下游信号转导通路的影响。采用大鼠肺巨噬细胞株NR8383,分别用25,50,100 mg·L-1的Poly(I∶C)与1,5,10 mg·L-1LPS刺激NR8383细胞,前者于3,6,12,24 h后取细胞上清,后者于6,12,24,48 h后取细胞培养上清液,酶联免疫吸附测定方法(ELISA)测定炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,通过上述2个指标选择Poly(I∶C)与LPS合适的浓度区间与反应的最适时间。利用其Poly与LPS配比为10∶1,20∶1,30∶1,40∶1,50∶1来探讨其对NR8383细胞的TNF-α,IL-1β的含量和TLR-2,3,4,6 mRNA表达的影响,以及桂枝汤含药血清的干预作用,通过上述TNF-α,IL-1β,TLR-2,TLR-3,TLR-4,TLR-6 6个指标对实验结果进行综合评价,筛选刺激效应和桂枝汤干预效应最为明显的Poly(I∶C)-LPS比例。结果:选择刺激时间为6 h,Poly(I∶C)在50 mg·L-1以下,LPS在1 mg·L-1时作为合适的刺激浓度。在所用Poly(I∶C)-LPS(10∶1,20∶1,30∶1,40∶1,50∶1)中,与正常组比较,Poly(I∶C)-LPS 50∶1组合刺激效应显著(P0.01),与相对应的模型组比较,桂枝汤含药血清对Poly(I∶C)-LPS 10∶1组合干预效果最为显著(P0.01)。结论:Poly(I∶C)-LPS 10∶1刺激NR8383巨噬细胞株NR8383可以作为一种桂枝汤汤证细胞模型,用于桂枝汤及其类方的基础研究。
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| 关 键 词： | 聚肌胞苷酸 内毒素 桂枝汤 Toll样受体(TLRs) 白细胞介素-1β(IL-1β) 肿瘤坏死因子-α(TNF-α) |
| 收稿时间： | 2018/2/26 0:00:00 |
Interference Effect of Guizhitang Drug Serum on Rat Macrophages NR8383 Cells Provoked by Different Ratio of Poly(I:C)-LPS |
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| ZHAN Xiao-ling,TANG Tian,XU Wen-hui,MA Ji,LI Lan-fang,LI Cang-hai and JIANG Ting-liang.Interference Effect of Guizhitang Drug Serum on Rat Macrophages NR8383 Cells Provoked by Different Ratio of Poly(I:C)-LPS[J].China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2018,24(14):84-90. |
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| Authors: | ZHAN Xiao-ling TANG Tian XU Wen-hui MA Ji LI Lan-fang LI Cang-hai and JIANG Ting-liang |
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| Institution: | Institute of Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China,Institute of Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China,Institute of Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China,Institute of Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China,Institute of Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China,Institute of Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China and Institute of Chinese Materia Medica, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China |
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