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黄芪甲苷对异丙肾上腺素诱导的大鼠原代心肌细胞损伤的抗凋亡作用
引用本文:武梦羚,宋耀鸿.黄芪甲苷对异丙肾上腺素诱导的大鼠原代心肌细胞损伤的抗凋亡作用[J].中国实验方剂学杂志,2018,24(10):137-143.
作者姓名:武梦羚  宋耀鸿
作者单位:南京中医药大学;南京中医药大学第三附属医院
基金项目:国家自然科学基金项目(81273716);南京市科技计划项目(201201067);江苏省“六大人才高峰”项目(2015-WSN-067)
摘    要:目的:研究黄芪甲苷对异丙肾上腺素诱导的SD大鼠乳鼠原代心肌细胞损伤的抗凋亡作用,并探讨相关的作用机制。方法:利用酶解法和差速贴壁方法从出生1~3 d的正常SD大鼠的乳鼠心脏中分离得到原代心肌细胞,种于24孔板,体外培养48 h后,设置空白组、模型组、美托洛尔组及黄芪甲苷低、中、高剂量组。预先给予各组对心肌细胞有害的儿茶酚胺类物质异丙肾上腺素(ISO),造成体外原代心肌细胞损伤模型,空白组心肌细胞不加ISO;30 min后予各治疗组相应浓度的美托洛尔(2.336μg·L~(-1))及黄芪甲苷低、中、高剂量(3,10,30μmol·L~(-1))。BCA法检测总蛋白含量,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测原代心肌细胞的B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关蛋白X(Bax)及Bcl-2相关k蛋白(Bak)的表达,流式细胞学法检测各组细胞的凋亡率,Hochest/PI双染法镜下观察各组细胞细胞核的形态,从而检测细胞的凋亡情况。结果:与空白组比较,各给药组(10~40μmol·L~(-1))原代心肌细胞的活力上调(P0.05);HOCHEST/PI双染结果显示,与模型组比较,美托洛尔组及黄芪甲苷中、高剂量亮蓝色凋亡细胞明显减少;细胞流式结果显示,与模型组比较,美托洛尔组凋亡率下调(P0.01),黄芪甲苷中剂量组凋亡率下调(P0.05),黄芪甲苷高剂量组凋亡率下调(P0.01);Bcl-2灰度值结果显示,与模型组比较,美托洛尔组Bcl-2的表达上调(P0.01),黄芪甲苷低剂量组Bcl-2表达上调(P0.05),黄芪甲苷中、高剂量组Bcl-2表达上调(P0.01);Bak灰度值结果显示,与模型组比较,美托洛尔组Bak的表达下调(P0.05),黄芪甲苷高剂量组Bak表达下调(P0.05);Bax灰度值结果显示,与模型组比较,美托洛尔组Bax的表达下调(P0.01),黄芪甲苷高剂量组Bax表达下调(P0.05)。结论:黄芪甲苷对异丙肾上腺素诱导的大鼠原代心肌细胞损伤有抗凋亡作用。

关 键 词:黄芪甲苷  异丙肾上腺素  美托洛尔  原代心肌细胞  凋亡
收稿时间:2017/11/28 0:00:00

Anti-apoptosis Effect of Astragaloside on Isoproterenol-induced Rat Primary Cardiomyocytes
WU Meng-ling and SONG Yao-hong.Anti-apoptosis Effect of Astragaloside on Isoproterenol-induced Rat Primary Cardiomyocytes[J].China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2018,24(10):137-143.
Authors:WU Meng-ling and SONG Yao-hong
Institution:Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, China and The Third Affiliated Hospital of Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210001, China
Abstract:
Keywords:
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