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基于nano-LC-LTQ/Orbitrap-MS筛选黄芩-黄连药对干预2型糖尿病KKAy小鼠的骨骼肌差异表达蛋白
引用本文:刘彤彤,肖琴,盛军庆,涂秀英,孙军,魏学鑫,于梅,章常华. 基于nano-LC-LTQ/Orbitrap-MS筛选黄芩-黄连药对干预2型糖尿病KKAy小鼠的骨骼肌差异表达蛋白[J]. 中国实验方剂学杂志, 2018, 24(17): 126-131
作者姓名:刘彤彤  肖琴  盛军庆  涂秀英  孙军  魏学鑫  于梅  章常华
作者单位:江西中医药大学药学院;南昌大学生命科学学院
基金项目:国家自然科学基金项目(81460622,81774194,81260660);江西省自然科学基金项目(20171BAB205095,20151BAB205079,20151BAB205077);江西省卫生计生委科研计划项目(2016A024)
摘    要:目的:采用nano-LC-LTQ/Orbitrap-MS鉴定2型糖尿病KKAy小鼠模型组与给药组的骨骼肌差异表达蛋白,推测黄芩-黄连药对(SC)防治2型糖尿病的作用机制。方法:取20只8~10周龄的雄性KKAy小鼠,给予全价高脂饲料,随机等分为2组,分别为黄芩-黄连药对组(27 g·kg~(-1))和模型组(灌胃等量水)。2组均连续灌胃8周,于最后1次给药后1 h处死小鼠,取骨骼肌在液氮中进行研磨,加裂解液及蛋白酶抑制剂提取蛋白,测定蛋白浓度,再进行蛋白变性、还原、烷基化、酶解及脱盐,利用nano-LC-LTQ/Orbitrap-MS检测,利用Xcalibur 2.2软件和Proteome Discoverer 1.4.0.288进行数据处理,采用Sieve v2.1(×64)进行无标样定量分析寻找相关差异蛋白,筛选并鉴定差异表达蛋白,并对差异表达蛋白进行生物信息学分析。结果:黄芩-黄连药对组与模型组共鉴定出107个差异表达蛋白质,经生物学分析筛选出与糖尿病相关的差异蛋白共5个,其中上调4个(5'-磷酸腺苷激活的蛋白激酶、脂联素等),下调1个(脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白4)。分析显示差异蛋白质主要涉及炎症反应、信号通路调节等生物过程。结论:通过有效的比较与分析,得到了一些参与胰岛素信号转导等通路的差异表达蛋白质,为研究黄芩-黄连药对防治胰岛素抵抗的分子机制提供了新靶点。

关 键 词:黄芩-黄连  药对  KKAy小鼠  蛋白质组学  差异表达蛋白
收稿时间:2017-12-18

Screening of Differentially Expressed Proteins in Skeletal Muscle of Type 2 Diabetes KKAy Mice Treated with Couplet Medicines of Scutellariae Radix and Coptidis Rhizoma Based on nano-LC-LTQ/Orbitrap-MS
LIU Tong-tong,XIAO Qin,SHENG Jun-qing,TU Xiu-ying,SUN Jun,WEI Xue-xin,YU Mei and ZHANG Chang-hua. Screening of Differentially Expressed Proteins in Skeletal Muscle of Type 2 Diabetes KKAy Mice Treated with Couplet Medicines of Scutellariae Radix and Coptidis Rhizoma Based on nano-LC-LTQ/Orbitrap-MS[J]. China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2018, 24(17): 126-131
Authors:LIU Tong-tong  XIAO Qin  SHENG Jun-qing  TU Xiu-ying  SUN Jun  WEI Xue-xin  YU Mei  ZHANG Chang-hua
Affiliation:School of Pharmacy, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China,School of Pharmacy, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China,School of Life Sciences, Nanchang University, Nanchang 330031, China,School of Pharmacy, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China,School of Pharmacy, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China,School of Pharmacy, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China,School of Pharmacy, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China and School of Pharmacy, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China
Abstract:
Keywords:Scutellariae Radix and Coptidis Rhizoma  couplet medicines  KKAy mice  proteomics  differentially expressed proteins
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