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日本血吸虫弹性蛋白酶基因的克隆、表达及虫期特异性转录
引用本文:黄成玉,卢艳,王玮,鞠川,冯正,杨忠,王升跃,胡薇. 日本血吸虫弹性蛋白酶基因的克隆、表达及虫期特异性转录[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2007, 25(5): 359-363
作者姓名:黄成玉  卢艳  王玮  鞠川  冯正  杨忠  王升跃  胡薇
作者单位:1. 华东理工大学生物工程学院,上海,200237
2. 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心,卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,上海,200025
3. 国家人类基因组南方研究中心,上海,200231
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划);国家高技术研究发展计划(863计划);国家自然科学基金;上海市青年科技启明星计划;美国国立卫生研究院TMRC
摘    要:目的 克隆和表达日本血吸虫弹性蛋白酶基因(SjCE-2b),纯化表达重组蛋白,并研究该基因在各虫期的转录情况。 方法 预测SjCE-2b基因的编码序列。绘制血吸虫尾蚴弹性蛋白酶家族成员系统进化树。用RT-PCR和蛋白质印迹(Western blotting)分析SjCE-2b基因在日本血吸虫各期转录的差异。将RT-PCR扩增得到的SjCE-2b基因亚克隆至载体pET28b,在大肠埃希菌中诱导表达得到重组蛋白rSjCE-2b,用组氨酸标签亲和层析法纯化表达产物,Western blotting分析其免疫原性。 结果 在虫卵、子胞蚴和成虫检测到SjCE-2b基因转录本(714 bp),表达的重组蛋白rSjCE-2b,相对分子质量约为Mr 31 000,与预测的融合蛋白相对分子质量相符。构建了重组原核表达载体SjCE-2b/pET28b,并在大肠埃希菌中表达。纯化后的重组蛋白rSjCE-2b可被日本血吸虫感染的兔血清识别。 结论 在日本血吸虫虫卵、子胞蚴和成虫发现SjCE-2b基因转录本。SjCE-2b基因有可能成为潜在的日本血吸虫病疫苗候选抗原和药物及诊断靶点。

关 键 词:日本血吸虫  弹性蛋白酶基因  原核表达
文章编号:1000-7423(2007)-05-0359-05
收稿时间:2007-05-24
修稿时间:2007-05-24

Cloning, Expression of Schistosoma japonicum Elastase Gene and its Stage-specific Transcription
HUANG Cheng-yu,LU Yan,WANG Wei,JU Chuan,FENG Zheng,YANG Zhong,WANG Sheng-yue,HU Wei. Cloning, Expression of Schistosoma japonicum Elastase Gene and its Stage-specific Transcription[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2007, 25(5): 359-363
Authors:HUANG Cheng-yu  LU Yan  WANG Wei  JU Chuan  FENG Zheng  YANG Zhong  WANG Sheng-yue  HU Wei
Affiliation:1 Biotechnology School, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China; 2 National Institute of Parasitic Diseases, Chinese Center for Disease Control and Prevention, WHO Collaborating Centre for Malaria, Schistosomiasis and Filariasis, Shanghai 200025, China; 3 Chinese National Human Genome Center at Shanghai, Shanghai 200231
Abstract:
Keywords:Schistosoma japonicum  Elastase gene  Prokaryotic expression
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