抑制血清应答因子表达影响转化生长因子β1介导的食管癌上皮细胞-间质转化的作用研究

目的研究血清应答因子( serum response factor，SRF)小干扰 RNA(small interference RNA，siRNA)影响转化生长因子 β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)介导的 Eca-109食管癌细胞发生上皮间质转化( epithelial-mesenchymal transition，EMT)的作用机制。方法体外培养 Eca-109食管癌细胞，实验分组为阴性对照 siRNA组、 TGF-β1+阴性对照 siRNA组、 TGF-β1+SRF- siRNA组。划痕实验检测细胞迁移能力；免疫细胞化学染色法检测 E-钙黏蛋白( E-cadherin)的表达；蛋白质印迹法检测 E-钙黏蛋白、 SRF、N-钙黏蛋白( N-cadherin)、 α-平滑肌肌动蛋白( α-smooth muscle actin，α-SMA)蛋白的表达。结果与阴性对照 siR- NA组细胞迁移百分比( 10.00±2.00)%相比较， TGF-β1+阴性对照 siRNA组细胞迁移百分比为( 50.67±4.73)%，迁移能力增强；与 TGF-β1+阴性对照 siRNA组相比较， TGF-β1+SRF-siRNA组细胞迁移百分比为(29.00±3.00)%，迁移能力下降，均差异有统计学意义( P＜0.001)。与阴性对照 siRNA组的 E-钙黏蛋白( 1.07±0.12)、 N-钙黏蛋白( 0.28±0.25)、 SRF(0.25±0.06)、 α-SMA(1.19±0.37)蛋白相比较， TGF-β1+阴性对照 siRNA组 E-钙黏蛋白( 0.45±0.06)表达下调，而 N-钙黏蛋白( 3.27±0.67)、 SRF(2.48±0.05)、 α-SMA(4.23±0.53)蛋白表达上调(均 P＜0.001)；与 TGF-β1+阴性对照 siRNA组相比较， TGF-β1+SRF-siRNA组 E-钙黏蛋白(0.82±0.05)表达上调， N-钙黏蛋白( 1.31±0.13)、 SRF(1.46±0.16)、 α-SMA(2.60±0.28)蛋白表达下调(均 P＜0.001)。结论基因沉默 SRF能够抑制 TGF-β1介导的食管癌细胞发生 EMT。

The inhibitory effects of SRF-siRNA on EMT in Eca-109 cells