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花叶型与艾叶型乌头叶片基因组DNA甲基化修饰的MSAP分析
引用本文:文欢,彭成,饶朝龙,张大燕,谢晓芳,高继海. 花叶型与艾叶型乌头叶片基因组DNA甲基化修饰的MSAP分析[J]. 中国中药杂志, 2016, 41(19): 3602-3608
作者姓名:文欢  彭成  饶朝龙  张大燕  谢晓芳  高继海
作者单位:成都中医药大学 药学院 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家 重点实验室培育基地, 四川 成都 611137,成都中医药大学 药学院 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家 重点实验室培育基地, 四川 成都 611137,成都中医药大学 药学院 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家 重点实验室培育基地, 四川 成都 611137,成都中医药大学 药学院 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家 重点实验室培育基地, 四川 成都 611137,成都中医药大学 药学院 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家 重点实验室培育基地, 四川 成都 611137,成都中医药大学 药学院 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家 重点实验室培育基地, 四川 成都 611137
基金项目:国家自然科学基金项目(J1310034);四川省科技支撑计划项目(2014SZ0156)
摘    要:建立乌头叶片DNA甲基化MSAP分析方法,并对不同形状的乌头叶片DNA甲基化修饰位点进行MSAP分析。以花叶型、艾叶型乌头不同部位叶片为实验材料,考察乌头叶片MSAP双酶切反应时间,筛选适宜的选择性扩增引物,并通过计算6%丙烯酰胺凝胶电泳图泳道和条带统计分析叶片甲基化修饰差异。结果 150 ng乌头叶片DNA MSAP双酶切反应体系在37℃条件下,酶切16 h较充分;使用25对筛选出的适宜性引物进行乌头基因组的MSAP选择性扩增,总共获得273个电泳条带,其中无甲基化或单链内甲基化228条,双链内甲基化条带27条,单链外甲基化条带18条,总甲基化率达16.48%;花叶型与艾叶型乌头总甲基化率稍有差异,分别为15.36%,14.34%,并各自获得8条、6条基因组甲基化修饰差异的核苷酸片段,占其总条带数的3.00%,2.26%。通过研究可为乌头植株的分子鉴定、良种选育与栽培,以及乌头的遗传演化等提供新思路。

关 键 词:乌头  叶型  甲基化敏感性扩增多态性
收稿时间:2016-05-23

Analysis on DNA methylation of mosaic and moxa type leaves of Aconitum carmichaeli by MSAP
WEN Huan,PENG Cheng,RAO Chao-long,ZHANG Da-yan,XIE Xiao-fang and GAO Ji-hai. Analysis on DNA methylation of mosaic and moxa type leaves of Aconitum carmichaeli by MSAP[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2016, 41(19): 3602-3608
Authors:WEN Huan  PENG Cheng  RAO Chao-long  ZHANG Da-yan  XIE Xiao-fang  GAO Ji-hai
Affiliation:State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, School of Pharmaceutical, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, China,State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, School of Pharmaceutical, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, China,State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, School of Pharmaceutical, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, China,State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, School of Pharmaceutical, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, China,State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, School of Pharmaceutical, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, China and State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, School of Pharmaceutical, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, China
Abstract:
Keywords:Aconitum carmichaeli  leaf type  methylation-sensitive amplified polymorphism
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