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参环毛蚓MT-2基因及启动子的克隆研究
引用本文:张秋凤,李薇,龚玲,黄传奇,陈立红. 参环毛蚓MT-2基因及启动子的克隆研究[J]. 中草药, 2016, 47(16): 2902-2908
作者姓名:张秋凤  李薇  龚玲  黄传奇  陈立红
作者单位:广州中医药大学中药学院, 广东 广州 510006;广州中医药大学中药学院, 广东 广州 510006;湖北中医药大学药学院, 湖北 武汉 430000;广州中医药大学中药学院, 广东 广州 510006;广州中医药大学中药学院, 广东 广州 510006
基金项目:国家自然科学基金项目(30772741);广东省科技计划项目(2009B060700006);广州市科技计划项目(2010Y1-C981)
摘    要:目的揭示参环毛蚓MT-2基因的转录调控机制,为今后采用基因工程技术改良参环毛蚓重金属富集性状奠定基础。方法根据已知的MT-2c DNA序列,设计特异引物,通过PCR扩增参环毛蚓MT-2基因的编码区基因组序列,扩增产物经测序后自行比对分析。基于该序列设计3条特异引物,采用基因步移技术克隆其上游的启动子序列,同时运用Promoter Prediction在线软件分析预测其顺式元件。结果经PCR扩增、测序后获得2 826 bp MT-2基因编码区序列,将该序列与已知MT-2 c DNA序列(登录号为KC787373.1)进行比对,发现MT-2编码区由4个外显子和4个内含子组成。基因步移技术克隆得到1 534 bp的启动子序列,经Promoter Prediction在线软件分析,结果显示该序列不仅含有TATA-box、CAAT-box等核心启动子软件,还具有3个特异响应重金属参与调控MT-2表达的MRE元件。结论参环毛蚓的MT-2基因能被重金属诱导表达,MT-2基因转录水平的金属调控是通过MT-2基因启动子区的金属调控元件MRE来实现的。

关 键 词:参环毛蚓  重金属富集  金属硫蛋白  MT-2基因  转录调控
收稿时间:2015-12-15

Cloning of MT-2 gene and its promoter in Pheretima aspergillum
ZHANG Qiu-feng,LI Wei,GONG Ling,HUANG Chuan-qi and CHEN Li-hong. Cloning of MT-2 gene and its promoter in Pheretima aspergillum[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2016, 47(16): 2902-2908
Authors:ZHANG Qiu-feng  LI Wei  GONG Ling  HUANG Chuan-qi  CHEN Li-hong
Affiliation:College of Chinese Herbal Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510006, China;College of Chinese Herbal Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510006, China;College of Pharmacy, Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan 430000, China;College of Chinese Herbal Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510006, China;College of Chinese Herbal Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510006, China
Abstract:
Keywords:
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