单纯Ⅱ型胶原酶消化法分离、培养人退变椎间盘髓核细胞的形态学观察 |
| |
引用本文: | 王 锋,吴小涛,王运涛,邵建树,张 明.单纯Ⅱ型胶原酶消化法分离、培养人退变椎间盘髓核细胞的形态学观察[J].中国脊柱脊髓杂志,2010,20(4):300-304. |
| |
作者姓名: | 王 锋 吴小涛 王运涛 邵建树 张 明 |
| |
作者单位: | 东南大学附属南京市中大医院骨科,210009,南京 |
| |
基金项目: | 江苏省自然科学基金,东南大学国家自然科学基金预研项目 |
| |
摘 要: | 目的:探讨单纯Ⅱ型胶原酶消化法体外培养扩增人退变椎间盘髓核细胞的可行性。方法:收集20例人退变椎间盘髓核,单纯Ⅱ型胶原酶消化分离出髓核细胞并连续培养传代,倒置相差显微镜和HE染色观察细胞形态学变化,甲苯胺蓝染色检测髓核细胞内聚集蛋白聚糖的表达,免疫细胞化学法行Ⅱ型胶原染色,观察髓核细胞的类软骨表型表达情况。结果:单纯Ⅱ型胶原酶消化法可较好的分离培养人退变椎间盘髓核细胞,20例人退变椎间盘髓核,培养成功16例;原代髓核细胞平均7d贴壁,呈类圆形或多角形,P1代髓核细胞平均12h贴壁,呈大梭形或多角形,两代细胞融合95%所需时间分别为30d和7d,差异有统计学意义(P0.01);聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原主要表达于原代和P1代髓核细胞浆内,被甲苯胺蓝染成天蓝色,免疫细胞化学染色主要表现为黄褐色沉淀,两代间聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的表达无统计学差异(P0.05)。结论:单纯Ⅱ型胶原酶消化法可简化髓核细胞分离步骤,提高培养效率;传一代后髓核细胞增殖速率提高,但仍维持类软骨表型,表达聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原。
|
关 键 词: | 椎间盘退行性变 髓核细胞 胶原酶 细胞培养 甲苯胺蓝 免疫细胞化学 |
收稿时间: | 2009/11/27 0:00:00 |
修稿时间: | 2/3/2010 12:00:00 AM |
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录! |
| 点击此处可从《中国脊柱脊髓杂志》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中国脊柱脊髓杂志》下载免费的PDF全文 |
|