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SFRP2基因重组腺病毒载体的构建与鉴定
引用本文:王儆,陈亮,陶熹,陈卓,王珍祥,李世荣.SFRP2基因重组腺病毒载体的构建与鉴定[J].中国美容医学,2012,21(15):1981-1984.
作者姓名:王儆  陈亮  陶熹  陈卓  王珍祥  李世荣
作者单位:1. 葛洲坝东湖社区服务中心全科 湖北 宜昌 443002
2. 重庆西南医院整形外科 重庆 400038
摘    要:目的:成功构建携带SFRP2基因的腺病毒载体。方法:从pGBKT-SFRP2质粒中扩增SFRP2基因,将SFRP2基因亚克隆至质粒穿梭载体pAd-Track-CMV。用脂质体转染法将重组腺病毒pAd-Track-PPARγ2-CMV和pAdEasy-1共转染293细胞,成功构建的重组腺病毒Ad-SFRP2,确定转染效率。原代培养增生性瘢痕成纤维细胞,利用Ad-SFRP2感染该细胞。通过RT-PCR和Western Blot分别检测感染后人瘢痕成纤维细胞及对照组细胞中SFRP2基因mRNA和蛋白表达水平。结果:RT-PCR检测结果显示腺病毒Ad-SFRP2的PCR产物约为904bp,SFRP2 mRNA表达水平明显增高;用抗SFRP2多克隆抗体进行Westernblot检测为阳性,感染的重组腺病毒载体在人瘢痕成纤维细胞中SFRP2蛋白有较高的稳定表达。结论:成功构建含有人SFRP2基因的重组腺病毒Ad-SFRP2;它可有效提高人增生性瘢痕成纤维细胞中SFRP2基因的表达水平。

关 键 词:SFRP2  腺病毒  增生性瘢痕  成纤维细胞

Construction and identification of a recombinant adenovirus vector containing SFRP2 gene
WANG Jing , CHEN Liang , TAO Xi , CHEN Zuo , WANG Zhen-xiang , LI Shi-rong.Construction and identification of a recombinant adenovirus vector containing SFRP2 gene[J].Chinese Journal of Aesthetic Medicine,2012,21(15):1981-1984.
Authors:WANG Jing  CHEN Liang  TAO Xi  CHEN Zuo  WANG Zhen-xiang  LI Shi-rong
Institution:1.Department of General Office of Health Service Center,East Lake Community,Yichang 443002,Hubei,China;2.Department of Plastic Surgery,Southwest Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China)
Abstract:
Keywords:
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