| PKH26标记单核细胞衍生的肝样细胞体内示踪研究 |
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| 引用本文： | 余幼林,施宝民,王秀艳,苏忠学,卢晓飞,张振海,孙小刚,梁锋. PKH26标记单核细胞衍生的肝样细胞体内示踪研究[J]. 中华肝胆外科杂志, 2012, 18(7) |
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| 作者姓名： | 余幼林 施宝民 王秀艳 苏忠学 卢晓飞 张振海 孙小刚 梁锋 |
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| 作者单位： | 1. 山东大学附属省立医院肝胆胰外科,济南,250021
2. 同济大学附属同济医院普外科, 上海,200065 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨人外周血单核细胞向肝样细胞潜能及单核细胞衍生的肝样细胞移植的有效示踪剂,并进一步观察受体鼠移植后肝样细胞存活、分布与转归情况.方法 分别设立A、B两组.A组为阴性对照组,在细胞培养过程中不添加诱导细胞分化肝细胞生长因子(HGF)和成纤维细胞生长因子-4 (FGF-4)；B组应用HGF和FGF-4体外联合诱导人外周血单核细胞向肝干细胞分化.鉴定和判断细胞分化的变化,采用免疫荧光细胞化学染色法检测细胞甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)和细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)表达.以红色荧光染料PKH26标记单核细胞衍生的肝样细胞,尾静脉注入受体鼠体内作为实验组.对照组注射等量生理盐水.分别于移植2周后取肝组织,通过荧光显微镜观察实验组肝样细胞向肝脏迁移与转归的情况.采用免疫荧光细胞化学染色法检测移植的肝样细胞白蛋白(albumin,ALB)的表达.结果 A组细胞随培养时间延长,单核细胞由刚分离出的较均一的圆形逐渐变得不规则,呈条索状、纤维样改变,少部分细胞呈圆形,细胞发生凋亡,裂解.B组细胞随诱导分化培养时间延长,细胞变大、变圆,呈集落生长,增殖活性强.B组有AFP和CK19阳性表达,而A组则没有表达.动物实验组受体鼠肝组织冰冻切片可见大量PKH26标记阳性的肝样细胞,对照组未发现PKH26标记阳性的肝样细胞.移植2周后行免疫荧光细胞化学染色法检测实验组肝样细胞ALB表达阳性.结论 在HGF和FGF-4体外联合诱导条件下,人外周血单核细胞具有向肝样细胞分化的潜能.并且,PKH26可作为肝样细胞移植的一种有效示踪剂.移居肝组织的肝样细胞2周后开始向成熟肝细胞分化,发挥肝细胞功能,表达白蛋白.
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| 关 键 词： | 外周血单核细胞 细胞分化 肝样细胞 移植 裸鼠肝脏 |
Study on hepatocyte-like cells differentiated from human peripheral blood mononuclear cells labeled by the Fluorescent Dye PKH26 in vivo |
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| YU You-lin , SHI Bao-min , WANG Xiu-yan , SU Zhong-xue , LU Xiao-fei , ZHANG Zhen-hai , SUN Xiao-gang , LIANG Feng. Study on hepatocyte-like cells differentiated from human peripheral blood mononuclear cells labeled by the Fluorescent Dye PKH26 in vivo[J]. Chinese Journal of Hepatobiliary Surgery, 2012, 18(7) |
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| Authors: | YU You-lin SHI Bao-min WANG Xiu-yan SU Zhong-xue LU Xiao-fei ZHANG Zhen-hai SUN Xiao-gang LIANG Feng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Human peripheral blood mononuclear cells Cell differentiation Hepatocytelike cells Transplantation Nude mice liver |
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