用地高辛标记的PCR/SSO方法进行HLA-B27等位基因检测 |
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作者姓名: | 蒋黎华 杨珏琴 范丽安 |
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作者单位: | 上海第二医科大学,上海市免疫学研究所 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,卫生部基金 |
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摘 要: | 目的建立检测HLA-B27等位基因的聚合酶链反应/顺序特异的寡核苷酸探针方法,并分析其实用性。方法采用4对引物E40s、E90as;E91as、E136as;E91bs、E181as;E40s、E130as分别扩增靶DNA,用10个探针CL-1~9和PAN-B27分别进行杂交,探针用地高辛系统标记和检测,可检定B*2701~2708共8个等位基因。结果通过对B27等位基因已明确的8个阳性对照DNA、5例B27阴性标本及75例阳性标本的检测,表明本方法技术稳定结果可靠,不会与其它HLAⅠ类基因产生交叉杂交而影响结果的指定。结论本研究为HLA-B27多态性和强直性脊椎炎关联研究提供了一种有效方法,也为HLAⅠ类分子基因分型研究积累了经验。
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关 键 词: | 聚合酶链反应 寡核苷酸探针 人类白细胞抗原-B27 等位基因 |
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