siRNA沉默β-Catenin对肝星状细胞增殖和凋亡的影响 |
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作者姓名: | 葛文松 吴建新 陈颖伟 范建高 |
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作者单位: | 上海交通大学医学院附属新华医院消化内科,上海市,200092 |
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基金项目: | 上海市教委选拔培养优秀青年教师科研专项基金 |
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摘 要: | 目的研究siRNA干扰β-Catenin表达,阻断Wnt/β-Catenin信号通路对肝星状细胞(HSC)增殖和凋亡的影响。方法将化学合成的siRNAβ-Catenin以Lipofectamine包裹,转染HSC-T6细胞,设阴性对照和空白对照;采用逆转录-聚合酶链反应和Western blotting检测细胞β-Catenin表达;采用Western blotting法检测细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达;采用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖和细胞凋亡。结果以不同浓度的β-Catenin SiRNA转染HSC-T6细胞后,β-Catenin mRNA水平比阴性对照组分别下调了51.3±3.6%、85.7±6.8%和94.5±7.5%(P均〈0.01),比空白对照组分别下调了50.5±3.4%、86.1±6.2%和93.7±7.2%(P均〈0.01);β-Catenin蛋白表达被抑制了56.43±2.88%(P〈0.01);Ⅰ和Ⅲ型胶原表达分别被抑制了46.58±3.46%(P〈0.01)和50.48±3.72%(P〈0.01);细胞增殖明显被抑制,最大抑制率达到44.8±2.8%(P〈0.01);细胞凋亡增加达28.6%(P〈0.05)。结论 siRNAβ-Catenin能高效抑制HSC-T6细胞β-Catenin表达,阻断Wnt/β-Catenin信号通路,从而抑制HSC-T6细胞增殖,促进凋亡,显著减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成和分泌,具有预防及治疗肝纤维化的潜力。
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关 键 词: | 肝星状细胞 小分子干扰RNA β-Catenin基因 增殖 凋亡 |
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