| 2株重组弓形虫P30抗原单克隆抗体的制备和鉴定 |
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| 引用本文： | 王际平,杨秋林,蔡亮,张如胜,张愉快,邱玉华. 2株重组弓形虫P30抗原单克隆抗体的制备和鉴定[J]. 中国病原生物学杂志, 2007, 2(5): 344-346 |
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| 作者姓名： | 王际平 杨秋林 蔡亮 张如胜 张愉快 邱玉华 |
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| 作者单位： | 1. 南华大学寄生虫教研室,湖南衡阳,421001
2. 苏州大学免疫学研究室,江苏苏州,215007 |
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| 基金项目： | 致谢：感谢苏州大学生物技术研究所邱玉华教授,孙中文博士和苏州第五人民医院朱翔博士的热情帮助和技术指导. |
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| 摘 要： | 目的制备重组P30抗原单克隆抗体,研究其生物活性。方法重组质粒pET28b-P30经BL21（DE3）表达,纯化、复性后免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备单克隆抗体。ELISA筛选阳性克隆,经亚克隆建株。体内诱生腹水法制备抗体,测定其亚类、效价,Western blot分析其特异性,双单抗夹心-ELISA测定其敏感度。双单抗夹心-ELISA法检测弓形虫感染鼠血清中的CAg。结果筛选出2株抗重组P30的单克隆抗体9D7、2H9,抗体重链分别为IgG2a、IgG1,轻链均为κ链,Western blot显示2株单抗均能识别弓形虫速殖体天然P30抗原。双单抗夹心-ELISA检测抗原量为0.5μg/ml;同法检测鼠血清中的CAg,感染第4、6、8 d的阳性率分别为20%、60%、60%。结论制备的P30抗原单克隆抗体具有较高的敏感性和特异性,为其应用研究打下了基础。
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| 关 键 词： | 重组P30抗原 杂交瘤技术 单克隆抗体 双单抗夹心-ELISA 循环抗原 |
| 文章编号： | 1673-5234（2007）05-0344-03 |
| 收稿时间： | 2006-11-06 |
| 修稿时间： | 2006-11-062007-03-24 |
Preparation and identification of two monoclonal antibodies against Toxoplasma gondii rP30 |
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| WANG Ji-ping,YANG Qiu-lin,CAI Liang,ZHANG Ru-sheng,ZHANG Yu-kuai,Qiu Yu-hua. Preparation and identification of two monoclonal antibodies against Toxoplasma gondii rP30[J]. Journal of Pathogen Biology, 2007, 2(5): 344-346 |
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| Authors: | WANG Ji-ping YANG Qiu-lin CAI Liang ZHANG Ru-sheng ZHANG Yu-kuai Qiu Yu-hua |
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| Affiliation: | 1. Department of Parasitology, Nanhua University, Hengyang 421001, China ; 2. Lab of Immunology, Suzhou University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Recombinant P30 B lyphocytes hybridization technique monoclonal antibody double-McAb-Sandwich-ELISA circulating antigen |
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