| 非小细胞肺癌生物标记物角蛋白19基因的克隆、表达及纯化 |
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| 引用本文： | 孙晓林,李梅,唐佳昕,李淑珍,唐晓波.非小细胞肺癌生物标记物角蛋白19基因的克隆、表达及纯化[J].国际免疫学杂志,2013,36(4):325-328. |
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| 作者姓名： | 孙晓林 李梅 唐佳昕 李淑珍 唐晓波 |
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| 作者单位： | 1. 哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室,150081
2. 上海交通大学医学院 |
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| 基金项目： | 哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(项目编号：2008RFXXS018) |
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| 摘 要： | 目的 克隆人角蛋白19(CK19)基因,原核表达重组蛋白并纯化,为建立一种新的非小细胞肺癌诊断方法奠定基础.方法 从宫颈癌HeLa细胞株中提取总RNA,经RT-PCR合成cDNA,设计特异性的引物,用PCR的方法扩增目的片段,构建pET-32a-CK19和pGEX-4T1-CK19表达载体,在BL21大肠杆菌中表达CK19重组蛋白纯化,并进行SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果 经PCR扩增后得到一条420 bp的DNA片段,构建载体后DNA测序,结果与预期序列一致.初步结果鉴定表明,表达和纯化的融合蛋白,与预期结果一致.结论 成功克隆CK19基因,并获得高纯度的CK19融合蛋白,为进一步制备体外诊断试剂打下基础.
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| 关 键 词： | 非小细胞肺癌 人角蛋白19 克隆 表达 纯化 |
Cloning, expression and purification of CK19 protein |
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| SUN Xiao-lin
,
LI Mei
,
TANG Jia-xin
,
LI Shu-zhen
,
TANG Xiao-bo.Cloning, expression and purification of CK19 protein[J].International Journal of Immunology,2013,36(4):325-328. |
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| Authors: | SUN Xiao-lin LI Mei TANG Jia-xin LI Shu-zhen TANG Xiao-bo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Non-small cell lung cancer Human kertatin 19 Cloning expression Purification |
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