截短的丙型肝炎病毒核心区基因的克隆和表达 |
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引用本文: | 胡道奇,唐爱国,周咏武,吴刚强,周松辉,莫喜明,冯惊涛.截短的丙型肝炎病毒核心区基因的克隆和表达[J].国际生物制品学杂志,2013,36(4):169-172. |
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作者姓名: | 胡道奇 唐爱国 周咏武 吴刚强 周松辉 莫喜明 冯惊涛 |
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作者单位: | 414000 岳阳,湖南康润药业有限公司研发部 |
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基金项目: | 湖南省科学技术厅科技重点计划项目(项目编号:2011SK2009) |
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摘 要: | 目的 克隆和表达截短的丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)核心区基因,为制备HCV核心区抗体准备抗原。方法 根据软件分析选取带有优势抗原表位的HCV核心区多肽,找出对应DNA序列,逆转录PCR扩增目的基因,并将其克隆到原核表达载体中进行诱导表达。表达的目的蛋白纯化后用间接ELISA法检测免疫活性。结果 获得了序列正确的HCV目的基因片段。表达的目的蛋白为可溶性蛋白,能被很好地纯化。使用该纯化蛋白检测各种样本,结果HCV阴性样本的平均吸光度(A)值为0.081,HCV阳性样本与阴性对照的A值之比均>2.1,乙型肝炎和梅毒阳性样本的A值都在0.101以下。结论 成功地克隆和表达了HCV核心区小片段基因,获得了具有良好抗原性的截短HCV核心区多肽。
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关 键 词: | 肝炎病毒 基因克隆 基因表达 蛋白纯化 |
Cloning and expression of truncated gene of hepatitis C virus core region |
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Institution: | Department of Research and Development, Hunan Kangrun Pharmaceutical Co., Ltd., Yueyang 414000, China |
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Abstract: | |
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Keywords: | Hepacivirus Gene cloning Gene expression Protein purification |
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