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截短的丙型肝炎病毒核心区基因的克隆和表达
引用本文:胡道奇,唐爱国,周咏武,吴刚强,周松辉,莫喜明,冯惊涛.截短的丙型肝炎病毒核心区基因的克隆和表达[J].国际生物制品学杂志,2013,36(4):169-172.
作者姓名:胡道奇  唐爱国  周咏武  吴刚强  周松辉  莫喜明  冯惊涛
作者单位:414000 岳阳,湖南康润药业有限公司研发部
基金项目:湖南省科学技术厅科技重点计划项目(项目编号:2011SK2009)
摘    要:目的  克隆和表达截短的丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)核心区基因,为制备HCV核心区抗体准备抗原。方法  根据软件分析选取带有优势抗原表位的HCV核心区多肽,找出对应DNA序列,逆转录PCR扩增目的基因,并将其克隆到原核表达载体中进行诱导表达。表达的目的蛋白纯化后用间接ELISA法检测免疫活性。结果  获得了序列正确的HCV目的基因片段。表达的目的蛋白为可溶性蛋白,能被很好地纯化。使用该纯化蛋白检测各种样本,结果HCV阴性样本的平均吸光度(A)值为0.081,HCV阳性样本与阴性对照的A值之比均>2.1,乙型肝炎和梅毒阳性样本的A值都在0.101以下。结论 成功地克隆和表达了HCV核心区小片段基因,获得了具有良好抗原性的截短HCV核心区多肽。

关 键 词:肝炎病毒  基因克隆  基因表达  蛋白纯化  

Cloning and expression of truncated gene of hepatitis C virus core region
Institution:Department of Research and Development, Hunan Kangrun Pharmaceutical Co., Ltd., Yueyang 414000, China
Abstract:
Keywords:Hepacivirus  Gene cloning  Gene expression  Protein purification  
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