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卵巢癌侧群细胞流式分选方法的建立及探讨
引用本文:孟泳圳,李力,钟艳平,张玮. 卵巢癌侧群细胞流式分选方法的建立及探讨[J]. 广西医科大学学报, 2013, 30(2): 175-180
作者姓名:孟泳圳  李力  钟艳平  张玮
作者单位:广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科 南宁 530021
基金项目:广西卫生厅重点项目资助(项目编号:重2010074)广西自然科学基金资助项目(项目编号:2012GXNSFAA053134)广西研究生教育创新计划项目资助(项目编号:YCSZ2012045)
摘    要:目的:探讨分选卵巢癌细胞株SKOV3中的侧群(side population,SP)细胞的荧光染料Hoechst33342的最佳染色浓度及SKOV3的最适细胞密度.方法:制备SKOV3细胞悬液,以荧光染料Hoechst33342和7-AAD染色,维拉帕米拮抗对照,选择不同浓度的Hoechst33342(2.5,3,4,5,6 mg/L)孵育1×106个/mL SKOV3细胞90 min,流式细胞仪检测SP细胞比例及活细胞比例;选取不同细胞密度的SKOV3细胞悬液(6×105,7×105,8×105,9×105,1×106个/mL),3 mg/L的Hoechst33342孵育90 min,流式细胞仪检测SP细胞比例及活细胞比例.结果:通过Hoechst33342蓝光和红光双参数图,SP细胞位于左下角两种荧光均很弱的区域.Hoechst33342浓度不变时,SP细胞比例随细胞密度的增加而升高;SKOV3细胞密度不变时,SP细胞比例及细胞活性随hoechst33342浓度升高而降低.卵巢癌SKOV3细胞株在细胞密度为8×105个/mL,加入终浓度为3 mg/L的Hoechst33342,37℃水浴90 min,为最佳染色条件,此时SP细胞比例为(1.12±0.104)%,且细胞保持良好的活性.结论:人卵巢癌细胞株SKOV3中存在SP细胞,Hoechst33342浓度及SKOV3细胞密度是影响SP细胞比例及细胞活性的重要因素.

关 键 词:卵巢癌  肿瘤干细胞  SP细胞  Hoechst33342  染色浓度  细胞密度

ESTABLISHMENT AND DISCUSSION OF A METHOD FOR SORTING OVARIAN CANCER SIDE POPULATION THOUGH FLOW CYTOMETRY
Meng Yongzhen , Li Li , Zhong Yanping , Zhang Wei. ESTABLISHMENT AND DISCUSSION OF A METHOD FOR SORTING OVARIAN CANCER SIDE POPULATION THOUGH FLOW CYTOMETRY[J]. Journal of Guangxi Medical University, 2013, 30(2): 175-180
Authors:Meng Yongzhen    Li Li    Zhong Yanping    Zhang Wei
Abstract:
Keywords:ovarian cancer  stem cells  side population cell  Hoechst33342  dye concentration  cell density
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