血管性痴呆大鼠模型学习记忆障碍与海马半胱氨酸蛋白酶1蛋白的表达：空白对照及量化盲法评估

目的：定量测定血管性痴呆大鼠的学习记忆成绩，同时观察海马半胱氨酸蛋白酶1蛋白在血管性痴呆大鼠海马中的表达及其意义。方法：实验于2004-01／11在中国医科大学动物实验室进行，取健康雄性SD大鼠100只，随机分正常对照组(n=28，仅分离双侧颈总动脉)、假手术组(n=28，仅麻醉，不做手术)，和血管性痴呆组(n=44)。采用血管阻断的方法，复制大鼠血管性痴呆模型，每组随机取10只大鼠，采用水迷宫实验进行行为学检测，定量测定其学习记忆成绩。每组剩余大鼠在缺血后24，48，72，96，120h及7d处死，用免疫组化方法检测海马区半胱氨酸蛋白酶1蛋白表达水平的变化。结果：100只大鼠死亡4只，进入结果分析96只。①水迷宫学习成绩：血管性痴呆组大鼠游完全程的时间、进入盲端的次数及时间(3．78&;#177;1．65)min，(5．21&;#177;1.56)次，(1.90&;#177;1．38)min]明显多于正常对照组及假手术组(0．68&;#177;0．12)min，(1．13&;#177;0．21)次，(0．21&;#177;0．08)min；(0．76&;#177;0．13)min，(0．98&;#177;0．32)次，(0．31&;#177;0．09)min]。②水迷宫记忆成绩：血管性痴呆组大鼠游完全程的时间、进入盲端的次数及时间(2．98&;#177;1．05)min，(5．62&;#177;2．11)次，(1．78&;#177;0．84)min]明显多于正常对照组及假手术组(0．24&;#177;0．16)min，(0．48&;#177;0．73)次，(0．04&;#177;0．02)min；(0．35&;#177;0．20)min，(0．52&;#177;0．80)次，(0．10&;#177;0．02)min]。③血管性痴呆组脑缺血后24h半胱氨酸蛋白酶1蛋白表达，为(82&;#177;12)个／视野，第3天时达高峰(198&;#177;20)个／视野]，明显多于正常对照组和假手术组(17&;#177;3)，(20&;#177;3)个／视野]。结论：血管性痴呆大鼠发生了明显的学习记忆功能障碍，在血管性痴呆大鼠海马脑区有大量半胱氨酸蛋白酶1蛋白表达。作为一种抑制细胞凋亡的基因，半胱氨酸蛋白酶1蛋白可能对血管性痴呆大鼠脑内与学习记忆密切相关的海马神经元有保护作用。