| 大鼠IL-6受体基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 李改丽,王百忍,张萍,费玲玲,段晓莉,鞠躬.大鼠IL-6受体基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[J].细胞与分子免疫学杂志,2002,18(5):417-420. |
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| 作者姓名： | 李改丽 王百忍 张萍 费玲玲 段晓莉 鞠躬 |
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| 作者单位： | 第四军医大学神经科学研究所,陕西,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助,No .39830 130 |
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| 摘 要： | 目的：获取大鼠IL－6受体（IL－6R）的基因并高效表达。方法：用PCR技术，从正常成年大鼠脑的cDNA文库中，获得编码IL－6R基因的序列。测序后，通过PCR扩增和基因重组，分别构建IL－6R基因全长和羧基端部分编码序列的表达载体，并导入大肠杆菌DH5α中，通过IPTG诱导表达重组融合蛋白。对表达的羧基端序列编码的融合蛋白过谷胱甘肽琼脂糖柱进行纯化。结果：获得正常成年大鼠I-6R(98-1493位）的基因，测序结果与已发表的基因序列相一致。重组蛋白以包涵体的形式进行表达。经SDS－PAGE分析，在相对分子质量（Mr)为74000和43000处，各有1条特异的蛋白带。对羧基端基因表达的包涵体形式的蛋白进行变性、重折叠及纯化后，得到了庙纯度融合蛋白。结论：成功地克隆正常成年大鼠IL－6R基因，并在E.coli DH5α中高效表达，为进一步制备抗IL－6R抗体和进行原位分子杂交研究创造了条件。
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 IL－6受体 克隆 表达 PCR技术 |
| 文章编号： | 1007-8738(2002)05-417-04 |
Cloning of rat IL-6 receptor gene and its expression in E. coli |
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| LI Gai-li,WANG Bai-ren,ZHANG Ping,FEI Ling-ling,DUAN Xiao-li,JU Gong Institute of Neurosciences,Fourth Military Medical University,Xi'an ,Shaanxi Province,China.Cloning of rat IL-6 receptor gene and its expression in E. coli[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2002,18(5):417-420. |
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| Authors: | LI Gai-li WANG Bai-ren ZHANG Ping FEI Ling-ling DUAN Xiao-li JU Gong Institute of Neurosciences Fourth Military Medical University Xi'an Shaanxi Province China |
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| Institution: | LI Gai-li,WANG Bai-ren,ZHANG Ping,FEI Ling-ling,DUAN Xiao-li,JU Gong Institute of Neurosciences,Fourth Military Medical University,Xi'an 710032,Shaanxi Province,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | interleukin-6 receptor cloning expression |
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