| 重组腺病毒Adeasy-HA117载体的构建及其在K562细胞的表达 |
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| 引用本文： | 郭玉霞,金先庆,罗庆,郑改焕,于洁,刘筱梅,温贤浩,徐酉华.重组腺病毒Adeasy-HA117载体的构建及其在K562细胞的表达[J].郑州大学学报(医学版),2009,44(3). |
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| 作者姓名： | 郭玉霞 金先庆 罗庆 郑改焕 于洁 刘筱梅 温贤浩 徐酉华 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属儿童医院血液科,重庆,400014 |
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| 摘 要： | 目的:构建携带耐药相关基因HA117的高滴度重组腺病毒,转染K562细胞,检测其在K562细胞中的表达情况.方法:用基因工程技术将ATRA相关耐药新基因HA117的cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,然后在细菌内与pAdeasy同源重组,后将重组腺病毒Adeasy-HA117经脂质体转染包装细胞HEK293,并收获原代的重组腺病毒Adeasy-HA117,经乒乓交互感染的方法扩增原代腺病毒,应用RT-PCR、荧光显微镜及流式细胞仪鉴定和检测重组腺病毒感染K562细胞后HA117的表达情况.结果:酶切罄定及PCR结果证明ATRA相关耐药新基因HA117重组腺病毒载体构建成功.携带新基因HA117重组腺病毒载体的效价达8.3×1011pfu/mL.RT-PCR检测到转染后K562细胞内HA117的表达.结论:成功获得携带新基因HA117的重组腺病毒,并能使其在K562细胞巾高表达.
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| 关 键 词： | 耐药相关基因HA117 腺病毒 K562细胞 |
Obtaining of high titer recombined adenovirus carring HA11 7 gene and its expression in K562 cells |
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| GUO Yuxia
,
JIN Xianqing
,
LUO Qing
,
ZHENG Gaihuan
,
YU Jie
,
LIU Xiaomei
,
WEN Xianhao
,
XU Youhua.Obtaining of high titer recombined adenovirus carring HA11 7 gene and its expression in K562 cells[J].Journal of Zhengzhou University: Med Sci,2009,44(3). |
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| Authors: | GUO Yuxia JIN Xianqing LUO Qing ZHENG Gaihuan YU Jie LIU Xiaomei WEN Xianhao XU Youhua |
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