| 重组β—半乳糖苷酶腺病毒载体的构建及其在血管闰滑肌细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 王家宁,王家宁,黄永章,王俊峰,王卫民,李瑞明,葛永贵,张群林.重组β—半乳糖苷酶腺病毒载体的构建及其在血管闰滑肌细胞中的表达[J].郧阳医学院学报,2000,19(4):193-196. |
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| 作者姓名： | 王家宁 王家宁 黄永章 王俊峰 王卫民 李瑞明 葛永贵 张群林 |
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| 作者单位： | 王家宁（郧阳医学院分子生物学实验室）
王家宁（郧阳医学院附属太和医院心内科，湖北 十堰 442000）
黄永章（郧阳医学院分子生物学实验室）
王俊峰（附属太和医院心内科，湖北 十堰 442000）
王卫民（郧阳医学院分子生物学实验室）
李瑞明（郧阳医学院分子生物学实验室）
葛永贵（附属太和医院心内科，湖北 十堰 442000）
张群林（附属太和医院心内科，湖北 十堰 442000） |
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| 摘 要： | 目的构建表达β-半乳糖苷酶(β-gal)的重组腺病毒，以期为再狭窄的基因治疗研究提供一个对照载
体和为腺病毒介导的基因转移的安全性、可行性、转染效率的研究提供一有用的工具。方法采用基因重组方法构
建穿梭质粒pAd-β-gal,通过同源重组法制备出重组腺病毒Ad-β-gal,转染的293细胞用X-gal染色鉴定Ad-β
-gal的正确与否。通过测定260nm的紫外光吸收值估计病毒高度。原代大鼠血管平滑肌细胞采用组织块培养
法。Ad-β-gal以100moi感染VSMCs并行X-gal染色，以观察β-gal在VSMCs中的表达情况。结果成功构建了
pAd-β-gal穿梭质粒和Ad-β-gal重组腺病毒，转染的293细胞和VSMCs经X-gal染为蓝色，病毒浓度为9×l011
pfu/ml,以100moiAd-β-gal转染VSMCs,其转染效率接近l00%。结论表达β-gal的重组腺病毒构建成功，并在
VSMCs中得到有效表达，本研究为将来再狭窄基因治疗研究提供了一对照载体，也为腺病毒介导的基因转移的安
全性、可行性、有效性的研究提供了一有用的工具。
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| 关 键 词： | 重组β－半乳糖苷酶 腺病毒 载体 血管平滑肌细胞 |
| 文章编号： | 1006-9674(2000)04-0193-04 |
| 修稿时间： | 2000年5月18日 |
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